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研發(fā)階段/n本成果通過對泰樂菌素小分子的改造，合成了人工免疫原和包被原，首次制備出高效價(1：128000)的特異性單克隆抗體，建立了豬肌肉和肝臟組織中泰樂菌素和替米考星多殘留檢測ELISA方法。以上述方法為基礎(chǔ)，在國內(nèi)外首次研制出同時檢測泰樂菌素、替米考星在豬肌肉和肝臟中殘留的ELISA試劑盒。通過與HPLC法的比對試驗(yàn)、動物殘留試驗(yàn)，并經(jīng)多家檢測機(jī)構(gòu)和研究單位的復(fù)核和應(yīng)用，結(jié)果表明該試劑盒技術(shù)參數(shù)能滿足對這兩種化合物殘留監(jiān)控要求，適用于泰樂菌素和替米考星多殘留的快速檢測。整體技術(shù)指達(dá)到國際領(lǐng)先水

山東是功能糖生產(chǎn)大省，功能糖生產(chǎn)品種齊全，在全國占據(jù)領(lǐng)先地位。近幾年來，隨著淀粉加工企業(yè)的增加，淀粉市場競爭激烈，功能糖生產(chǎn)成為淀粉深加工的一個重要方向。酶法制備功能糖，因其節(jié)能、降耗、環(huán)保等優(yōu)勢，受到企業(yè)的青睞。如何獲取高效酶制劑，降低酶制備成本，增強(qiáng)酶制備功能糖的產(chǎn)品安全性成為行業(yè)的競爭熱點(diǎn)。 齊魯工業(yè)大學(xué)王瑞明教授團(tuán)隊(duì)，經(jīng)過多年探索，形成了完整的功能糖酶制劑安全表達(dá)技術(shù)體系，多數(shù)成果達(dá)到國際先進(jìn)、國際領(lǐng)先水平。酶法制備海藻糖關(guān)鍵技術(shù)及其產(chǎn)業(yè)化，2016年獲山東省技術(shù)發(fā)明一等獎。該技術(shù)在國家自然基金、山東省高新技術(shù)自主創(chuàng)新工程專項(xiàng)等項(xiàng)目資助下，首次利用結(jié)構(gòu)生物學(xué)、生物信息學(xué)及分子生物學(xué)技術(shù)改造了酶的耐酸性、耐熱性和底物轉(zhuǎn)化率；構(gòu)建了酶的自誘導(dǎo)分泌重組枯草芽孢桿菌表達(dá)體系；研發(fā)了多柱循環(huán)模擬移動床連續(xù)色譜分離海藻糖技術(shù)。該技術(shù)已在德州匯洋生物科技有限公司、保齡寶生物股份有限公司、山東隆大生物工程有限公司等企業(yè)推廣應(yīng)用，項(xiàng)目應(yīng)用單位近三年累計(jì)實(shí)現(xiàn)新增銷售額8億元，利潤1.8億元，帶來了良好的經(jīng)濟(jì)、生態(tài)和社會效益。

-酮戊二酸是一種重要的有機(jī)酸，在食品、醫(yī)藥、化工和化妝品等行業(yè)都有 廣泛應(yīng)用。目前，工業(yè)上生產(chǎn)?-酮戊二酸主要采用化學(xué)法，由于化學(xué)法合成?-酮 戊二酸的過程中存在嚴(yán)重的安全問題，在食品和化妝品的應(yīng)用中受到限制。而微 生物發(fā)酵法正以其獨(dú)特的優(yōu)勢：高產(chǎn)量、低能耗、可持續(xù)發(fā)展、環(huán)境友好等受到 越來越多的關(guān)注。因此，微生物發(fā)酵法生產(chǎn)?-酮戊二酸在食品、化妝品和保健品 行業(yè)具有廣闊的應(yīng)用前景。主要技術(shù)性能指標(biāo)：在 5 M3 發(fā)酵罐中?-酮戊二酸的平均產(chǎn)量為 64.2 g/L，發(fā)酵周期平均為 154.7 hr，提取總收率平均為 89.1%。

成果簡介： 本研究提供了一種全細(xì)胞催化制備環(huán)磷腺苷(cAMP)的方法，從cAMP生產(chǎn)菌株中克隆得到的腺苷酸環(huán)化酶基因，利用基因重組大腸桿菌實(shí)現(xiàn)在細(xì)胞水平催化生產(chǎn)cAMP，以三磷酸腺苷為原料，在鎂離子、丙酮酸等物質(zhì)條件

核苷酸是一類十分重要的具有生理活性的生化物質(zhì)，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、乳業(yè)等行業(yè)。本項(xiàng)目技術(shù)在生物法生產(chǎn)核苷酸的關(guān)鍵技術(shù)上取得了重大突破，（1）篩選得到新的產(chǎn)核酸酶P1的菌株，并首次利用氣升式生物反應(yīng)器高效制備核酸酶P1，酶活較國內(nèi)水平提高近10倍，達(dá)到了5000 u/mL；（2）利用反應(yīng)－分離耦合新技術(shù)催化RNA降解，核苷酸濃度較國內(nèi)其他單位高2-3倍，達(dá)到了30 g/L；（3）采用高效的吸附/膜分離集成技術(shù)分離核苷酸，分離收率達(dá)到90%以上，較其他方法提高5-10％，能耗、污染物排放大幅度降低；（4）發(fā)明了醇析和鹽析的復(fù)合結(jié)晶新技術(shù)及反應(yīng)結(jié)晶新技術(shù)，結(jié)晶收率達(dá)到90%以上，較其他方法提高5-10％，產(chǎn)品質(zhì)量符合國際標(biāo)準(zhǔn)。應(yīng)用領(lǐng)域: 廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、乳業(yè)等行業(yè)。

環(huán)磷酸腺苷(cAMP)為蛋白激酶致活劑，作為細(xì)胞內(nèi)的第二信使有著廣泛的生理作用，對糖、脂肪代謝、核酸、蛋白質(zhì)的合成調(diào)節(jié)等起著重要的作用。臨床上用于治療心絞痛、心肌梗死、心肌炎及心源性休克。它也可作為藥物中間體制備二丁酰環(huán)磷腺苷和環(huán)磷腺苷葡甲胺，發(fā)揮更有效的生理及藥理作用。cAMP還可用于畜禽食品添加劑，在離體條件下模擬生長激素的作用，促進(jìn)畜禽生長，增加優(yōu)質(zhì)禽產(chǎn)品產(chǎn)量。通過篩選獲得了cAMP的高產(chǎn)菌株，利用離子束誘變技術(shù)對菌株進(jìn)行改造，結(jié)合代謝調(diào)控手段，進(jìn)一步提高cAMP的產(chǎn)量，由此可產(chǎn)生數(shù)億直接經(jīng)濟(jì)效益。相比化學(xué)合成法，可大幅度降低原料成本原料成本和能量消耗。本產(chǎn)品的發(fā)展有利于帶動我國相關(guān)產(chǎn)業(yè)如醫(yī)藥、食品添加劑產(chǎn)業(yè)的繁榮發(fā)展，產(chǎn)生間接經(jīng)濟(jì)效益達(dá)數(shù)十億。應(yīng)用領(lǐng)域: 廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、添加劑等行業(yè)。

提供一種通過直流電泳沉積法制備磁性活性炭的方法：利用鐵鹽溶膠中含鐵膠粒帶正電荷的性質(zhì)，在外加脈沖電場作用下使鐵膠體顆粒定向電泳至固定于陰極附近的活性炭微孔洞中；然后通過在堿溶液中浸漬發(fā)生原位共沉淀反應(yīng)得到磁性活性炭。本技術(shù)方法可實(shí)現(xiàn)強(qiáng)磁性磁性活性炭的綠色高效制備，與已有方法相比，磁性活性炭中磁性物含量高，磁性強(qiáng)，同時工藝簡單，成本較低，經(jīng)改造后適于工業(yè)生產(chǎn)。

癌癥已成為公眾健康的重大殺手，每年因癌癥死亡的人數(shù)接近1000萬，傳統(tǒng)的放療、化療由于過高的毒副作用，外科手術(shù)部位有限而難以有效治療，靶向藥物的發(fā)展極大推動了腫瘤治療，然而也存在易產(chǎn)生耐藥性等問題。免疫療法作為新興的腫瘤治療策略，具有精準(zhǔn)打擊、低毒副作用、不易產(chǎn)生耐藥等優(yōu)點(diǎn)逐步受到關(guān)注，其中溶瘤病毒能夠選擇性在腫瘤細(xì)胞中復(fù)制而不破壞正常細(xì)胞，因而具有很大的應(yīng)用前景（詳細(xì)內(nèi)容見前期推送科普系列——溶瘤病毒腫瘤治療）。目前許多溶瘤病毒以實(shí)體瘤為治療靶標(biāo)，而應(yīng)用于血液腫瘤的成功案例卻很少。近日，吉林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院于湘暉課題組在國內(nèi)主辦的SCI雜志Signal Transduction and Targeted Therapy上在線發(fā)文，題為“Enhancing the antitumor activity of an engineered TRAIL-coated oncolytic adenovirus for treating acute myeloid leukemia”，該研究構(gòu)建了表達(dá)TRAIL融合蛋白的溶瘤腺病毒，與人參皂苷Rh2聯(lián)用，實(shí)現(xiàn)選擇性殺傷血液腫瘤，為白血病的治療提供了新思路。急性髓系白血病（AML）是髓系造血干細(xì)胞或祖細(xì)胞的惡性病變，原始細(xì)胞異常增生、分化。盡管一線治療、鞏固化療的方案能夠完全緩解許多患者病癥，但是仍有部分患者無明顯療效，還有一些患者存在復(fù)發(fā)情況，亟需新的治療方式。之前的研究中，研究者曾構(gòu)建了表面展示腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體（TRAIL）的腺病毒，能夠結(jié)合腫瘤表面死亡受體DR4和DR5，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，減弱病毒肝臟趨向性。為了更好評估病毒載體的感染與復(fù)制造成的影響，研究者通過流式細(xì)胞儀分析了病灶內(nèi)分離的AML細(xì)胞上的TRAIL受體（死亡受體DR4/5、誘餌受體DcR1/2）和腺病毒受體（CAR、整合素 αvβ3 和整合素αvβ5），發(fā)現(xiàn)多數(shù)表達(dá)中等水平TRAIL受體，培養(yǎng)細(xì)胞系也有類似現(xiàn)象，而正常粒細(xì)胞、T細(xì)胞這兩類受體表達(dá)很低，因此選擇TRAIL表面展示腺病毒能夠較好進(jìn)行靶向治療。研究者為構(gòu)建溶瘤腺病毒，通過將腺病毒A3衣殼蛋白IX插入“拉鏈結(jié)構(gòu)”，使得TRAIL能夠與“拉鏈結(jié)構(gòu)”偶聯(lián)展示在衣殼蛋白表面。由于只有約17%的衣殼蛋白連接上了TRAIL，研究者試圖采用新的策略：在大腸桿菌中表達(dá)可溶性TRAIL-“拉鏈結(jié)構(gòu)”融合蛋白，再將可溶性的蛋白與病毒粒子孵育，離心后分離表面覆蓋可溶性TRAIL的腺病毒粒子。通過變性凝膠電泳、高效液相色譜、斑點(diǎn)雜交等證實(shí)了改造的腺病毒zA4載有活性更高的TRAIL。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)也證明zA4相較于原來的版本A3、A4侵染能力、特異性顯著提高。細(xì)胞結(jié)合試驗(yàn)用于評估侵染活性，證明了攜帶TRAIL顯著促進(jìn)了腺病毒的內(nèi)吞；定量PCR試驗(yàn)用于評估病毒復(fù)制能力，zA4在癌細(xì)胞中復(fù)制顯著強(qiáng)于其他載體。為有效評估zA4載體抗白血病活性，在不同感染復(fù)數(shù)下以不同載體侵染培養(yǎng)AML細(xì)胞系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)zA4顯著誘導(dǎo)培養(yǎng)細(xì)胞的凋亡。對臨床分離原代AML細(xì)胞深入探究，zA4顯著抑制了大部分AML細(xì)胞的增殖，然而值得注意的是，少部分不表達(dá)死亡受體的細(xì)胞無明顯變化。溶瘤病毒能否在體內(nèi)發(fā)揮作用直接決定了其是否具有臨床價值，基于之前的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，研究者對皮下移植造模小鼠注射了腺病毒載體，發(fā)光成像和病毒基因組分析均證實(shí)了載體腫瘤組織靶向性。zA4處理小鼠顯著抑制腫瘤生長，正常器官組織形態(tài)學(xué)、生化特征均未變化，因此未產(chǎn)生肝損傷。同時還觀察到凋亡重要因子caspase-3水平顯著上調(diào)。在更加真實(shí)的小鼠白血病模型中，也觀察到相似的結(jié)果，病毒在腫瘤消失后也并不會長時間存在。然而總有一些原代AML細(xì)胞TRAIL表達(dá)量很低，影響zA4的效果。聯(lián)系之前的研究，人參皂苷Rh2能夠誘導(dǎo)白血病細(xì)胞死亡受體表達(dá)和細(xì)胞毒性，研究者就試圖通過Rh2增強(qiáng)TRAIL誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡。通過IC50測定、信號通路分析證實(shí)了存在協(xié)同效應(yīng)，在細(xì)胞、小鼠水平上都得到了證實(shí)，兩者聯(lián)合使用促進(jìn)白血病腫瘤的凋亡。該研究通過優(yōu)化載體結(jié)構(gòu)、聯(lián)合用藥等方式增強(qiáng)了溶瘤腺病毒的活性，拓寬了溶瘤病毒的潛在適應(yīng)癥范圍，后續(xù)深入的分子機(jī)制探究以及療效的評估將有助于為白血病治療開辟新的道路。

一種微機(jī)電系統(tǒng)的圓片級真空封裝方法，屬于微機(jī)電系統(tǒng)的封裝方法，解決現(xiàn)有封裝方法存在的問題，使得微型真空腔長時間保持真空，滿足十年以上使用壽命的要求。本發(fā)明包括：刻蝕步驟：在蓋板圓片上對應(yīng)硅基片 MEMS 器件的位置刻蝕相應(yīng)空間尺寸的凹坑，再環(huán)繞凹坑刻蝕環(huán)形凹槽；吸氣劑淀積步驟：在所述凹坑和凹槽內(nèi)淀積吸氣劑薄膜；鍵合步驟：在真空環(huán)境下將蓋板圓片和硅基片緊密鍵合。本發(fā)明解決了現(xiàn)有封裝方法存在的真空保持時間短、密封質(zhì)量低、可靠性差、成本高的問題，可以長時間保持微型腔體內(nèi)的真空度，極大的推動圓片級 MEMS

本發(fā)明公開了一種耦合熱溶萃取和熱解制備高品質(zhì)生物油和氣體的方法，首先采用熱溶萃取法對生物質(zhì)進(jìn)行脫氧提質(zhì)萃取，得到無水無灰、高碳含量、低氧含量和含有大量芳香碳結(jié)構(gòu)的低分子量萃取物；然后將所述的低分子量萃取物進(jìn)行熱解，收集氣體產(chǎn)物、液體產(chǎn)物(生物油)和固體產(chǎn)物(焦)。本發(fā)明通過耦合熱溶萃取和熱解技術(shù)所得到的生物油碳含量高、氧含量低、熱值高，并且生物油腐蝕性低、高附加值的芳香烴類化合物含量高，可以大大減少生物油的后處理工藝。另外，所得到的氣體產(chǎn)物的熱值增大。本發(fā)明工藝簡單，無需催化劑和氫氣，生產(chǎn)成本低，產(chǎn)物附加值高，具有較高的經(jīng)濟(jì)效益、環(huán)境效益和廣闊的應(yīng)用前景。