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菌種來源于傳統食品，鑒定為枯草芽孢桿菌，無安全性風險；發酵原料以農副產品為主，資源豐富，成本低；發酵周期短，能耗少，工藝相對簡單；發酵菌株基因工程菌已構建成功，產酶水平提高潛力巨大；二次膜過濾組合步驟提取，收率高，步驟簡化，廢水排放少。最適 pH 在 8～10，最適溫度 55℃；具備與堿性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、中性蛋白酶的良好匹配特性 創新要點 無酸性蛋白酶活性，而中性和堿性內切型蛋白酶的活性很低；；與 ProteAX酶同樣酶單位加量下比較，Zj016 氨肽酶水解后的小肽含量更高，水解更加徹底。 

1.痛點問題 表面活性素是一種枯草芽孢桿菌脂肽，分子結構含7個氨基酸環肽及13-16個碳鏈長度的脂肪酸，作為脂肽家族生物表面活性劑的代表性分子，具有優異的表面/界面活性、穩定性及抑菌、殺蟲等性能。因此，其在石油開采、工農業、醫藥、日化等領域展現出了非常廣闊的應用前景。 但發酵產率低嚴重制約了表面活性素的工業化生產和應用。研究表明，野生菌株的產量通常為1g/L以下。培養基和培養條件優化后，產量提高也很有限。菌株的基因工程改造方面也比較困難。表面活性素（脂肽）合成機制為特殊的非核糖體肽合成機制，基因簇很大，長度達到26Kb以上。因此很難實現異源表達，只能進行基因組原位突變改造。其分子結構中既包含氨基酸、也包括脂肪酸，因此代謝途徑也很復雜。此外，發酵培養過程中，嚴重的起泡和泡沫溢出問題也制約了工業化的進程。 2.解決方案 化工系于慧敏教授團隊從南海底泥等特殊環境中篩選獲得了產表面活性素野生枯草芽孢桿菌，進一步采用原位編輯超強啟動子工程、特點氨基酸和脂肪酸代謝工程和營養細胞-芽孢調控綜合策略，成功構建高產表面活性素的無休眠枯草芽孢桿菌超級細胞工廠，并進一步打通了高產表面活性素新工藝，獲得了表面活性素液體和粉末產品。 3.合作需求 本項目尋求有志于在石油開采、工農業、日化洗滌等不同應用領域進行脂肽（表面活性素）新產品開發的企業開展合作，尤其是在上述不同領域具有孵化資源或資金，在工程化、產品化所需的場地、實驗條件等方面具有生產和銷售優勢或經驗的企業。也尋求對不同應用場景具有共同開發興趣的企業開展技術合作。最后，也希望與一些高科技園區進行對接，推動產品生產線建設。

中試階段/n該成果屬于獸用微生物添加劑制備技術應用領域，涉及一株緩解畜禽應激的枯草芽孢桿菌選育及應用。該發明從禽源分離篩選的對養殖動物常見腸道致病菌如金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、沙門氏菌具有明顯的抑菌效果的枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）HDRaBS1。生物功能驗證表明該菌株具有抗逆性強和抗應激等特點，可用于制備抗畜禽應激的微生物制劑，其中的制劑包括畜禽飼用微生物添加劑。還公開了該枯草芽孢桿菌HDRaBS1的分離鑒定方法及其在畜禽用單菌劑制備中的應用。

（一）蠟樣芽孢桿菌蠟樣芽孢桿菌NJYH63305是團隊自行篩選的有益芽孢桿菌，廣泛應用于農業、醫藥、食品保健、飼料等領域。在農業領域，是一種集抑菌、殺蟲、促生于一體的環境友好型高效生防制劑，對茶輪斑病菌、黃瓜枯萎病菌、立枯絲核菌、煙草赤星病菌、茶云紋葉枯病菌、小麥全蝕病菌、小麥紋枯病、尖鐮孢菌、鐮刀菌、終極腐霉菌等植物病害及小菜蛾具有較強抑制作用。在醫藥領域，可調節人體腸道微生態平衡，適于治療急慢性痢疾、腸炎、腹瀉、嬰幼兒腹瀉引起的腸功能紊亂等；在食品保健領域，可作為食品添加劑，長期服用能促進營養物質的消化吸收，減少腸道疾病的發生，提高免疫能力、增強抗病能力。 1、蠟樣芽孢桿菌國內外研究進展目前，國內外蠟狀芽孢桿菌研究大多處于實驗室內研究階段，其商品化并應用于農業防治的實例較少。國內市場上蠟樣芽孢桿菌農用制劑大部分為復配試劑，同時其大規模培養過程中也存在不少問題，如發酵放大過程信息采集困難、制劑有效期不長、產品貨架期短等，這些問題的深入研究對解決蠟樣芽孢桿菌高密度培養瓶頸、降低蠟樣芽孢桿菌生產成本、促進細胞大規模培養領域重大突破具有重要意義。2、本課題組技術優勢（1）團隊以項目為紐帶，建立了蠟樣芽孢桿菌在線監控的高密度培養與多階段發酵集成技術，在1000L發酵罐上蠟樣芽孢桿菌活菌數高達800億個/g, 比初始培養提高了230%，達國際領先水平；（2）篩選的芽孢保護劑，可提高蠟樣芽孢桿菌活性，延長半衰期40％以上；（3）協同江蘇省農科院及南京農業技術推廣站進行綠色防控技術推廣，于江蘇浦口林大蔬菜基地、江寧區湖熟街道設施蔬菜基地、溧水傅家邊茶廠等地建立2800畝示范區，重點試驗核心區460畝。推廣示范區內，蠟樣芽孢桿菌對水稻紋枯病、灰霉病、晚疫病等真菌病害抑制率達51.8％～85.9％，與蘇云金芽孢桿菌（Bt）進行增效試驗，小菜蛾殺滅率提高29%，降低化學農藥使用量50％以上，農藥殘留量低于國家無公害農產品標準；（4）目前已在國內外重要期刊發表學術論文10余篇，出版專著《高效有益微生態制劑開發與利用——蠟樣芽孢桿菌》，申請國家發明專利4項，授權3項，其中3項（ZL200910028025.1、ZL201010579133.0、ZL200910028320.7）在南京新百藥業有限公司成功實現轉化。（二）凝結芽孢桿菌團隊自行篩選獲得一株益生凝結芽胞桿菌NJYHHWG 877005，除具有和乳酸菌及雙歧桿菌同樣的保健功效外，還具有耐酸、耐熱、耐鹽、容易培養和保存的特點。凝結芽孢桿菌為兼性厭氧菌，進入腸道后會消耗游離氧，有利于厭氧微生物乳酸菌和雙歧桿菌的生長，多用于調節腸道內微生態菌群平衡，團隊自主知識產權的凝結芽胞桿菌NJYHHWG 877005對甜瓜枯萎病菌、番茄早疫病菌、西瓜炭疽病菌等有很強的防治效果，可進行新型高效生物農藥的開發。

本發明涉及一株解淀粉芽孢桿菌Bacillus?amyloliquefaciensHMQAU140045，2015年12月1日保藏于中國科學院微生物所內中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏編號：CGMCC?No.11768。本發明為藍莓毛色二胞枝枯病提供了一個高效的微生物，開辟了一個新的途徑；本發明解淀粉芽孢桿菌菌株HMQAU140045對藍莓毛

項目簡介 本項目利用具有自主知識產權的乙偶姻（3-羥基-2-丁酮）高產菌株——枯草桿菌，通過有效的發酵控制策略，促進乙偶姻的生成；并利用固定化菌體作為生物催化劑，構建枯草桿菌轉化葡萄糖生成乙偶姻的高效生產工藝，有效解除了產物抑制現象；并建立了一套高效的乙偶姻產品提取純化工藝。該技術是國家科 技支撐項目的成果，乙偶姻生產水平達到目前國際領先水平，已申報兩項國家專利。 創新要點 采用的乙偶姻高產菌株具有自主知識產權；建立了簡單、高效、低成本的葡萄糖轉化生產乙偶姻的生產工藝。 

成果簡介： 飼料級微生態制劑在我國的研究與利用起步較遲，主要存在客戶成本投入大，產品穩定性差，活菌含量低等問題。針對以上問題，本成果利用現代生物技術手段，完成了自主知識產權的飼料級芽孢桿菌和乳酸菌發酵及高密度活菌包埋技術研究。成果對飼料級芽孢桿菌和乳酸菌發酵條件進行優化，利用補料流加技術對其進行高密度培養，提高菌體的發酵密度，使發酵后的有效活菌數達到1×

凝結芽孢桿菌是一種可以產乳酸的芽孢桿菌，具備乳酸菌的腸道調理功能，又具有芽孢桿菌的抗逆性。用于畜禽養殖，能達到保健康、促增重、降糧耗的作用。凝結芽孢桿菌已列入農業微生物飼料添加劑目錄。 項目自主篩選得到一株性能優良的凝結芽孢桿菌；采用液體發酵工程，200產品性能穩定，不含雜菌；通過工藝優化，實現了高效制備。已完成了 30 噸發酵罐級別的試制，發酵液菌體濃度最高為 200cfu/mL， 通過精制形成 100--10000 億 cfu/g 規格的菌粉產品。

本項目建立了一套完整、高效的微生物發酵制備雙乙酰的工藝方法。該方法利用具有自主知識產權的雙乙酰高產枯草桿菌，通過基因工程與代謝工程手段，強化雙乙酰合成途徑，并通過有效的發酵控制策略，實現了雙乙酰的高效穩定生產；并建立了一套高效的雙乙酰產品提取純化工藝。 創新要點 利用具有自主知識產權的雙乙酰高產菌株，建立了一套完整、高效、穩定、適于規模化生產的微生物發酵制備雙乙酰的工藝路線；所生產雙乙酰產品具有天然等同度。