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項(xiàng)目針對國內(nèi)外脂溶性功能因子微膠囊化產(chǎn)品儲藏穩(wěn)定性差、生物利用率低、 配料安全性問題等諸多品質(zhì)不足，提出以構(gòu)建乳化和成膜特性俱佳的食品大分子乳化體系為基礎(chǔ)，進(jìn)行包載脂溶性功能因子的高生物利用率、高穩(wěn)態(tài)化、可控型納米顆粒及固態(tài)粉末產(chǎn)品的綠色制備。產(chǎn)品結(jié)構(gòu)多樣，填補(bǔ)了國內(nèi)市場空白，縮小了我國食品配料產(chǎn)業(yè)與發(fā)達(dá)國家的差距。取得了一系列創(chuàng)新性成果。 針對脂溶性營養(yǎng)素微膠囊化產(chǎn)品載量低、生物利用率差等問題，利用天然蛋白質(zhì)的分子柔順性和復(fù)雜大分子結(jié)構(gòu)，采用增溶、乳化-溶劑揮發(fā)高效制備技術(shù)，提高營養(yǎng)素載量，同時收縮載體分子體積、減小粒徑，制備獲得高載量、安全、無油型包載營養(yǎng)素的蛋白質(zhì)納米顆粒。該產(chǎn)品粒徑范圍在 60-100nm，β-胡蘿卜素載量較普通含油型載體提高了 100 倍，具有抗胃蛋白酶消化和完全的小腸吸收特性，β-胡蘿卜素生物利用率是未包埋時的 25 倍，抗氧化活性提高了 2-8 倍。針對蛋白質(zhì)易在等電點(diǎn) pH、高鹽、高溫等極端環(huán)境下因變性而失穩(wěn)，采用Maillard 糖基化反應(yīng)對其進(jìn)行接枝，通過控制反應(yīng)進(jìn)程及糖基供體，獲得等電點(diǎn)不沉淀、乳化穩(wěn)定性提高 5-7 倍，變性溫度提高 10℃以上的高穩(wěn)定蛋白。以 其為載體制備的抗環(huán)境因子干擾型納米顆粒在pH2.0-10.0 范圍內(nèi)粒徑均穩(wěn)定在 100nm 以下，4 °C 下儲藏 6 個月，營養(yǎng)素保留率達(dá) 92%以上。 針對液態(tài)乳化產(chǎn)品在儲藏過程中的不穩(wěn)定性，利用淀粉的結(jié)構(gòu)可塑性，在確低黏度且兼具乳化和成膜雙重特性的辛烯基琥珀酸（OSA）酯化淀粉的改性機(jī)制的基礎(chǔ)上，提出同步改性-乳化-干燥技術(shù)，構(gòu)建了脂溶性營養(yǎng)素的粉末化制品。通過分析 OSA 淀粉分子分散密度和取代度與功能因子儲藏穩(wěn)定性及生物有效性之間的相關(guān)性，獲得了生物利用率提高 10 倍以上的乳化粉末產(chǎn)品。復(fù)水后乳液 保持納米級粒徑，室溫下儲藏半年保留率達(dá) 95%以上。 針對不易使用熱處理手段的熱敏性風(fēng)味油脂，提出納米乳液包埋-多孔淀粉 吸附的兩步非熱固化技術(shù)。創(chuàng)新性的采用“熱液處理”原淀粉結(jié)合生物酶法打孔，制備得到吸油率為 135%的高吸附型多孔淀粉。強(qiáng)揮發(fā)性薄荷油納米乳液多孔淀粉吸附產(chǎn)品，在室溫敞口放置 40 天，保留率可達(dá) 98%以上，且產(chǎn)物在 160-200℃ 高溫條件下具有緩釋特性。

本發(fā)明涉及豬ApoE基因敲除載體及其構(gòu)建方法與應(yīng)用，本發(fā)明的載體命名為pApoEKO-DTA-M，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO : 1所示，其構(gòu)建方法包括如下步驟：(1)擴(kuò)增豬ApoE基因側(cè)翼序列作為基因打靶的長臂和短臂；(2)短臂與打靶載體ploxp分別酶切、連接后，再與長臂連接；去除tk，與dta基因片段連接；(3)在長短臂之間插入特異性啟動子Cre，構(gòu)建得到ApoE基因敲除載體。本發(fā)明的豬ApoE基因敲除載體可用于培育敲除了ApoE基因的豬，用于動脈硬化模型動物的制備。

本發(fā)明公開了一種抗蟲融合基因,該基因包括從5’-3’依次含有編碼BT晶體毒素Cry1的核苷酸序列和編碼Cry9Aa毒素的核苷酸序列;且上述2個核苷酸序列位于同一個開放閱讀框內(nèi)。該抗蟲融合基因包括Cry1Aa、Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1Aa的修飾基因、Cry1Ab的修飾基因或Cry1Ac的修飾基因;還包括Cry9Aa或者Cry9Aa經(jīng)過修飾的基因。本發(fā)明還同時公開了上述抗蟲融合基因所編碼的融合蛋白,該融合蛋白從N端至C端依次為Cry1晶體毒素和Cry9Aa毒素。本發(fā)明的融合蛋白能用于制備轉(zhuǎn)基因抗蟲農(nóng)作物。

本發(fā)明涉及幾丁質(zhì)合酶，特別涉及卵菌門中的幾丁質(zhì)合酶，其氨基酸序列為與如SEQ ID No.4所示的氨基酸序列在相似性在75％以上，優(yōu)選在80％以上，更優(yōu)選在90％以上，最優(yōu)選在95％以上且具有與如SEQ ID No.4所示的氨基酸序列相同功能的氨基酸序列。所述幾丁質(zhì)合酶的活性水平能夠調(diào)節(jié)卵菌的活性孢子囊和活性游動孢子的產(chǎn)量從而影響卵菌的致病力或寄主的發(fā)病程度。

（給予一名突變患者的卵子體外注射一定劑量的野生型TRIP13 cRNA，可使卵子成功排出第一極體）復(fù)旦大學(xué)生物醫(yī)學(xué)研究院教授王磊和副研究員桑慶團(tuán)隊(duì)聯(lián)合國內(nèi)多家生殖中心，研究發(fā)現(xiàn)了導(dǎo)致人類卵子MI期阻滯的第二個突變基因TRIP13（

本發(fā)明公開了植物耐熱相關(guān)蛋白TaXPD及其編碼基因與應(yīng)用。本發(fā)明所提供的蛋白質(zhì)為如下a1)或a2)或a3)：a1)氨基酸序列是序列表中序列2所示的蛋白質(zhì)；a2)在序列表中序列2所示的蛋白質(zhì)的N端或/和C端連接標(biāo)簽得到的融合蛋白質(zhì)；a3)將a1)或a2)所示的蛋白質(zhì)經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加得到的與植物耐熱性相關(guān)的蛋白質(zhì)。實(shí)驗(yàn)證

缺乏安全、高效率的基因?qū)胼d體是當(dāng)前基因治療面臨的關(guān)鍵科學(xué)問題和技術(shù)難題。我們在前期研究中，針對目前常用的聚乙烯亞胺（PEI25K）非病毒基因載體面臨的不可降解、毒性大、難代謝、靶向性差等問題，采用肝素與小分子量聚乙烯亞胺（PEI）為主要原料，設(shè)計、制備了一種新型的肝素/PEI腫瘤靶向基因治療載體，具有可降解、毒性低、可靶向腫瘤、可靜脈注射等特點(diǎn)，顯示了較好的臨床應(yīng)用前景。本項(xiàng)目將在前期研究的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步優(yōu)化肝素/PEI的制備工藝，闡明影響肝素/PEI生物學(xué)效應(yīng)的關(guān)鍵因素，研究其體內(nèi)分布、代謝和早期安全性，研發(fā)一種具有臨床應(yīng)用前景的新型肝素/PEI靶向腫瘤基因治療載體，為創(chuàng)制新型腫瘤基因治療藥物提供新的基因?qū)胂到y(tǒng)選擇。 針對當(dāng)前常用PEI25K（聚乙烯亞胺）非病毒基因載體不可降解、毒性高和靶向性差的缺點(diǎn)，首先采用肝素偶聯(lián)小分子量PEI制備了一種新型可降解、毒性低、轉(zhuǎn)染效率高的陽離子肝素-PEI基因載體，進(jìn)一步利用肝素具有腫瘤靶向性、帶負(fù)電荷、可在腫瘤部位快速降解、生物相容性好等特點(diǎn)，通過在DNA/肝素復(fù)合物表面修飾肝素，制備了一種腫瘤靶向的新型肝素/PEI基因載體。下一步將研究肝素/PEI的粒度分布、行貌、表面電位、穩(wěn)定性、基因裝載能力、降解行為、基因釋放行為等理化性質(zhì)，闡明制備工藝對這些重要理化性質(zhì)的影響規(guī)律。研究肝素/PEI的細(xì)胞毒性、轉(zhuǎn)染效率、腫瘤靶向性、體內(nèi)分布等生物學(xué)效應(yīng)，闡明肝素/PEI的理化性質(zhì)對這些體內(nèi)外生物學(xué)效應(yīng)的影響規(guī)律。基于我們已有的非病毒基因載體中試生產(chǎn)平臺，設(shè)計肝素/PEI中試生產(chǎn)流程，開展中試制備工藝研究。

從水稻中克隆了一個新的粒形調(diào)控基因 GS9，該基因突變可以改良稻米外觀品質(zhì)。結(jié)合常規(guī)回交選育或基因靶向敲除等方法，將 GS9 突變基因用于改良目標(biāo)品種的粒形和稻米品質(zhì)。