本發(fā)明涉及豬ApoE基因敲除載體及其構(gòu)建方法與應(yīng)用,本發(fā)明的載體命名為pApoEKO-DTA-M,其核苷酸序列如SEQ?ID?NO : 1所示,其構(gòu)建方法包括如下步驟:(1)擴(kuò)增豬ApoE基因側(cè)翼序列作為基因打靶的長臂和短臂;(2)短臂與打靶載體ploxp分別酶切、連接后,再與長臂連接;去除tk,與dta基因片段連接;(3)在長短臂之間插入特異性啟動(dòng)子Cre,構(gòu)建得到ApoE基因敲除載體。本發(fā)明的豬ApoE基因敲除載體可用于培育敲除了ApoE基因的豬,用于動(dòng)脈硬化模型動(dòng)物的制備。
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