磁性殼聚糖復合微球制備固定化葡萄糖異構酶的方法
一種磁性殼聚糖復合微球制備固定化葡萄糖異構酶的方法,其特征在于:這種磁性殼聚糖復合微球制備固定化葡萄糖異構酶的方法為:一、向0.4~0.6mol/L的FeCl230~100ml和FeCl350~100ml中,加入分子量為4000的聚乙二醇6.0~10.0g,在磁力攪拌器下充分溶解,再用氨水調節溶液至pH8~10,繼續攪拌30min~50min,用重蒸水洗滌抽濾后真空冷凍干燥即得Fe3O4磁核;二、將殼聚糖粉末在3%~6%乙酸中超聲分散10min,制0.02~0.08g/ml殼聚糖溶液,通過乳化劑與Fe3O4磁核超聲分散并電動攪拌10min進行混合,使之形成微乳體系,并與1%~5%戊二醛交聯在2000r/min下繼續攪拌2~4h,然后用石油醚、丙酮和重蒸水洗滌,抽濾真空冷凍干燥后即得磁性殼聚糖復合微球;三、將制備好的磁性殼聚糖復合微球先用磷酸緩沖液pH7.0~7.8浸泡,抽濾后加入用緩沖液稀釋后的濃度為4mg/ml~16mg/ml的葡萄糖異構酶15~20ml,在室溫搖床上振蕩4~10h,取出放入4℃靜置過夜,傾出上清液,沉淀用蒸餾水洗滌再用上述磷酸緩沖液洗滌,直至洗滌液檢測不到戊二醛和游離酶,無紫外吸收,抽濾得固定化葡萄糖異構酶
黑龍江八一農墾大學
2021-05-04