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【發(fā) 明 人】李念光；唐于平；段金廒【摘要】本發(fā)明涉及藥物化學(xué)研究領(lǐng)域，具體涉及一類(lèi)新型的基于體內(nèi)代謝機(jī)制的燈盞乙素苷元甲基化產(chǎn)物以及它的制備方法和在防治血栓藥物中的應(yīng)用。藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明提供的燈盞乙素苷元甲基化產(chǎn)物具有較好的溶解性以及抗氧化、抑制細(xì)胞損傷等藥理作用，可開(kāi)發(fā)成新的防治血栓性疾病的藥物。

項(xiàng)目成果/簡(jiǎn)介:本成果課題來(lái)源于廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目農(nóng)村科技領(lǐng)域。 番石榴葉是一種民間用于降血糖輔助作用的果樹(shù)葉，含有豐富的多酚、黃酮和萜類(lèi)以及多糖等活性成分。目前番石榴葉只有茶葉粗制產(chǎn)品，存在降糖效果不穩(wěn)定、口感差，推廣難等問(wèn)題，嚴(yán)重阻礙了該天然資源的應(yīng)用發(fā)展。研究證明，通過(guò)微生物固態(tài)發(fā)酵，可以促進(jìn)番石榴葉中天然多酚和黃酮類(lèi)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化和釋放,將一些低活性、不易被人體吸收的黃酮糖苷類(lèi)物質(zhì)（如蘆丁、槲皮素-3-o-β-D-葡萄糖苷等）轉(zhuǎn)化為易于吸收的苷元物質(zhì)（如：槲皮素和山萘酚等），從而提高其生物活性,包括抗氧化活性和降血糖活性；同時(shí)真菌代謝的多糖類(lèi)物質(zhì)具有輔助降血糖功能，可增強(qiáng)發(fā)酵產(chǎn)品的功效。應(yīng)用范圍:制造業(yè)效益分析:成果采用篩選的益生菌和番石榴葉為主要原料發(fā)酵生產(chǎn)，開(kāi)發(fā)出功能、口感適宜的降血糖食品（番石榴葉發(fā)酵茶制品，番石榴葉降糖餐條），健康成分清晰，安全測(cè)試合格，形成了規(guī)范生產(chǎn)工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、安全性評(píng)價(jià)、降糖功能性評(píng)價(jià)等系列文件。本成果技術(shù)穩(wěn)定，已通過(guò)中試驗(yàn)證，適用于進(jìn)入產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，產(chǎn)品可作為輔助降血糖食品，適用于高血糖人群，同時(shí)產(chǎn)品的市場(chǎng)化生產(chǎn)推廣，可促進(jìn)番石榴種植產(chǎn)業(yè)發(fā)展，帶領(lǐng)當(dāng)?shù)剞r(nóng)民發(fā)家致富。

本成果課題來(lái)源于廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目農(nóng)村科技領(lǐng)域。 番石榴葉是一種民間用于降血糖輔助作用的果樹(shù)葉，含有豐富的多酚、黃酮和萜類(lèi)以及多糖等活性成分。目前番石榴葉只有茶葉粗制產(chǎn)品，存在降糖效果不穩(wěn)定、口感差，推廣難等問(wèn)題，嚴(yán)重阻礙了該天然資源的應(yīng)用發(fā)展。研究證明，通過(guò)微生物固態(tài)發(fā)酵，可以促進(jìn)番石榴葉中天然多酚和黃酮類(lèi)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化和釋放,將一些低活性、不易被人體吸收的黃酮糖苷類(lèi)物質(zhì)（如蘆丁、槲皮素-3-o-β-D-葡萄糖苷等）轉(zhuǎn)化為易于吸收的苷元物質(zhì)（如：槲皮素和山萘酚等），從而提高其生物活性,包括抗氧化活性和降血糖活性；同時(shí)真菌代謝的多糖類(lèi)物質(zhì)具有輔助降血糖功能，可增強(qiáng)發(fā)酵產(chǎn)品的功效。

動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病的發(fā)病率和病死率逐年上升，已經(jīng)成為威脅我國(guó)人民健康的主要問(wèn)題。

本發(fā)明涉及一種檢測(cè)紅肉蘋(píng)果花青苷降低豬卵巢顆粒細(xì)胞內(nèi)活性氧的方法。按如下步驟操作：用丙酮浸提出紅肉蘋(píng)果中的花青苷，抽濾，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至丙酮除盡，剩余液體用濾膜過(guò)濾后，4℃保存?zhèn)溆茫惑w外培養(yǎng)豬卵巢顆粒細(xì)胞；用不同體積分?jǐn)?shù)的紅肉蘋(píng)果花青苷和活性氧陽(yáng)性對(duì)照試劑Rosup刺激豬卵巢顆粒細(xì)胞F1代6小時(shí)；給細(xì)胞裝載熒光探針DCFH?DA，收集細(xì)胞后用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。本發(fā)明方法原理可靠，操作簡(jiǎn)單，結(jié)果顯示，紅肉蘋(píng)果花青苷能降低細(xì)胞內(nèi)的活性氧水平，且隨著濃度的增加效果越明顯。

本發(fā)明公開(kāi)了一種從野棉花葉中提取的三萜皂苷類(lèi)化合物及其制備方法和用途，其特點(diǎn)將干燥野棉花葉粉碎，平均粒度為300～500μm，按料液比1g∶15～25mL加入正己烷，室溫下震蕩18～30h，過(guò)濾、分離正己烷萃取液；回收脫脂野棉花葉，按料液比1g∶20～30mL加入甲醇提取劑，室溫震蕩24～48h，分離上清液，并將上清液濃縮干燥后得甲醇浸膏；得率10～14％；再將上述甲醇浸膏懸浮于甲醇50～100mL，上大孔吸附樹(shù)脂DiaionHP-20層析柱，用甲醇-水梯度洗脫，濃度為0wt％、20wt％、40wt％、60wt％、80wt％、100wt％，洗脫流速為2～4mL/min；收集上述100wt％甲醇洗脫液，濃縮干燥后得到樣品，用半制備高效液相色譜分離純化得到該三萜皂苷類(lèi)化合物。

本發(fā)明提供了一株樺褐孔菌QD04及其轉(zhuǎn)化虎杖生成白藜蘆醇、三萜皂苷和多糖的方法，所述樺褐孔菌QD04保存于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，編號(hào)為CCTCC?M?2015036，本發(fā)明利用藥用真菌QD04將植物中的白藜蘆醇苷轉(zhuǎn)化為白藜蘆醇，大大提高了其白藜蘆醇的收率，工藝簡(jiǎn)單，重復(fù)性好；菌體能夠利用虎杖合成自身活性物質(zhì)三萜皂苷和多糖；發(fā)酵產(chǎn)物樺褐孔菌菌絲體含有豐富的人體必需氨基酸，具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值；一次發(fā)酵過(guò)程同時(shí)獲得白藜蘆醇、三萜皂苷、多糖和樺褐孔菌菌絲體4種產(chǎn)品，生產(chǎn)過(guò)程附加值高；所述樺褐孔菌能夠更加徹底地水解虎杖纖維素，使虎杖生物質(zhì)資源得到充分利用，減少了資源浪費(fèi)和環(huán)境污染。