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以肉類加工、流通、貯藏等下游生產(chǎn)鏈為切入點(diǎn)，以工廠加工生產(chǎn)、超市賣場(chǎng)銷售、冷鏈運(yùn)輸流通、廚房貯藏烹飪等為主要場(chǎng)景設(shè)計(jì)，對(duì)氣單胞菌、單增李斯特菌、腸炎沙門(mén)氏菌等的交叉污染建模理論進(jìn)行了完善，定量觀測(cè)并模擬了食源性致病菌在不同傳遞介質(zhì)和操作方式影響下的交叉污染情況，并與消費(fèi)者攝入 后的定量暴露評(píng)估、風(fēng)險(xiǎn)管理預(yù)警、限量標(biāo)準(zhǔn)制定、軟件參數(shù)設(shè)置等相結(jié)合，特別是提出了采用矩陣的形式對(duì)氣單胞菌在不同場(chǎng)景下和不同介質(zhì)之間的轉(zhuǎn)移過(guò)程進(jìn)行量化的直觀方法（，模擬了廚房環(huán)境下消費(fèi)者食用不同材質(zhì)案板處理過(guò)的污染

1.微生物專業(yè)人才 2.對(duì)菌種進(jìn)行分離、純化、復(fù)壯的人才 3.海洋生物酶解專業(yè)人才

箱體為手提式一體工程塑料制作完成，外觀尺寸（cm）：55*45*15主要配置及用材：顯微鏡、動(dòng)物細(xì)胞切片、植物細(xì)胞切片、典型動(dòng)物細(xì)胞圖片、典型植物細(xì)胞圖片。大型真菌（香菇、平蘑、木耳、銀耳、靈芝、冬蟲(chóng)夏草）圖片、霉菌（面包霉、污斑）圖片、酵母菌圖片、細(xì)菌圖片、病毒模型、霉菌結(jié)構(gòu)示意圖、細(xì)菌結(jié)構(gòu)示意圖、病毒結(jié)構(gòu)示意圖 等,各種器材有序嵌放于珍珠棉發(fā)泡成型的空間內(nèi)。

針對(duì)不合理施用肥料及集約化生產(chǎn)等導(dǎo)致的土壤生物退化，土壤生態(tài)系統(tǒng)調(diào)控能力下降，植物土傳病害加劇等問(wèn)題，開(kāi)展了農(nóng)用功能微生物的篩選及其在農(nóng)業(yè)廢棄物肥料化、土壤微生態(tài)修復(fù)調(diào)理、植物抑病促生等方面的研究。研究獲得200多株對(duì)10余種主要農(nóng)作物土傳病原靶標(biāo)菌有較強(qiáng)防病促生優(yōu)良微生物菌株，開(kāi)發(fā)出生防放線菌菌株3株、真菌1株、細(xì)菌2株。在此基礎(chǔ)上集成功能微生物高密度培養(yǎng)技術(shù)、土壤微生態(tài)系統(tǒng)的快速修復(fù)技術(shù)和微生物干預(yù)植物減害、生態(tài)友好技術(shù)。開(kāi)發(fā)了放線菌高活性菌粉、放線菌有機(jī)肥和放線菌液體肥料等產(chǎn)品，并建立了相應(yīng)生產(chǎn)線。該成果既能實(shí)現(xiàn)土壤生物退化及連作障礙的微生物修復(fù)，又能實(shí)現(xiàn)生產(chǎn)減肥減藥、產(chǎn)品提質(zhì)增效；該成果實(shí)施后預(yù)期年生產(chǎn)菌劑固態(tài)6000噸，每噸售價(jià)20000元；液態(tài)5000噸，每噸售價(jià)15000元。

通過(guò)微生物育種和基因工程手段相結(jié)合，獲得了一株脯氨酸高產(chǎn)菌株黃色短桿菌。發(fā)酵培養(yǎng) 65~68 h， L-脯氨酸產(chǎn)量高達(dá) 100 g/L，葡萄糖得率為 45%左右。 關(guān)鍵技術(shù) (1)本研究以玉米漿為氮源，有效的降低了發(fā)酵成本； (2)以葡萄糖和味精為原料生產(chǎn) L-脯氨酸的高轉(zhuǎn)化率發(fā)酵，該法綠色、環(huán)保、可持續(xù)，具有經(jīng)濟(jì)競(jìng)爭(zhēng)力，有很好的產(chǎn)業(yè)應(yīng)用前景。

結(jié)合文獻(xiàn)調(diào)研和數(shù)據(jù)庫(kù)檢索，選擇 L-氨基酸脫氨酶在大腸桿菌中進(jìn)行異源表達(dá)，對(duì)菌株進(jìn)行發(fā)酵條件優(yōu)化和轉(zhuǎn)化條件優(yōu)化，并對(duì)野生型 L-氨基酸脫氨酶進(jìn)行蛋白質(zhì)工程改造，一定程度上減輕了產(chǎn)物抑制作用，產(chǎn)量和轉(zhuǎn)化率都有所提高。主要技術(shù)指標(biāo)：濕菌體 15g/L，底物 L-纈氨酸 100 g/L，α-酮異戊酸產(chǎn)量為 95.6 g/L，轉(zhuǎn)化率為 96.4%。 關(guān)鍵技術(shù) (1)以大腸桿菌為宿主，生長(zhǎng)快，周期短，催化效率高； (2)對(duì)野生型 L-氨基酸脫氨酶進(jìn)行蛋白質(zhì)工程改造，一定程度上減輕了產(chǎn)物抑制作用，產(chǎn)量和轉(zhuǎn)化率都有所提高； (3)微生物轉(zhuǎn)化具有專一性強(qiáng)、條件溫和的優(yōu)點(diǎn)，該法綠色、環(huán)保、可持續(xù)，具有經(jīng)濟(jì)競(jìng)爭(zhēng)力，有很好的產(chǎn)業(yè)應(yīng)用前景。 

谷氨酸脫羧酶(glutamate decarboxylase , GAD)能專一地催化 L-谷氨酸裂解為γ-氨基丁酸和 CO2 的作用，以發(fā)酵培養(yǎng)的全細(xì)胞或酶液作為催化劑轉(zhuǎn)化生產(chǎn)γ-氨基丁酸，所需設(shè)備簡(jiǎn)單，條件容易控制，轉(zhuǎn)化體系雜質(zhì)含量少，收率高，環(huán)境友好。本技術(shù)方法通過(guò)蛋白質(zhì)工程改造和基因工程手段構(gòu)建了高產(chǎn)谷氨酸脫 羧酶的突變株，經(jīng)培養(yǎng)后，轉(zhuǎn)化體系中添加濕菌體 10 g/L，以分批補(bǔ)料添加谷氨酸，轉(zhuǎn)化 7 h，γ-氨基丁酸產(chǎn)量為 425.0 g/L，摩爾轉(zhuǎn)化率達(dá)到 98%，γ-氨基丁酸生產(chǎn)強(qiáng)度達(dá)到 60.7 g/(L?h)。 關(guān)鍵技術(shù) (1) 以大腸桿菌為宿主，生長(zhǎng)快，周期短，催化效率高； (2)以廉價(jià)的富馬酸為底物生產(chǎn)高附加值β-丙氨酸，成本低，收益高； (3)微生物轉(zhuǎn)化具有專一性強(qiáng)、條件溫和的優(yōu)點(diǎn)，該法綠色、環(huán)保、可持續(xù)， 具有經(jīng)濟(jì)競(jìng)爭(zhēng)力，有很好的產(chǎn)業(yè)應(yīng)用前景

浮游植物在表層獲取光能固定CO2，形成顆粒有機(jī)碳（POC）往下沉降，在深海再礦化后生成銨（NH4+），從而為深海化能自養(yǎng)細(xì)菌/古菌提供了能量來(lái)源。因此，氨氧化古菌和亞硝氧化細(xì)菌所介導(dǎo)的兩步硝化過(guò)程是實(shí)現(xiàn)光能傳遞到深海被利用的重要途徑，是深海重要的供能過(guò)程，支撐了海洋“黑暗固碳”——不依賴于光合作用的化能自養(yǎng)固碳，為深海生物圈提供了“新”的有機(jī)質(zhì)，同時(shí)積累硝氮。由于亞硝氧化菌群研究的長(zhǎng)期滯后，氨氧化和亞硝氧化功能群在深海的協(xié)作關(guān)系始終不明了，因此國(guó)際上對(duì)深海硝化菌群支撐的碳（C）−氮（N）耦合機(jī)理（定性）的理解仍極為有限，對(duì)C−N計(jì)量學(xué)關(guān)系（定量）的準(zhǔn)確估算仍是空白。 該研究工作結(jié)合多組學(xué)分析、生理學(xué)實(shí)驗(yàn)、現(xiàn)場(chǎng)原位速率及動(dòng)力學(xué)觀測(cè)和模擬，以及生態(tài)系統(tǒng)模型，闡釋了氨氧化古菌和亞硝氧化細(xì)菌顯著差異的代謝策略，及兩步氧化過(guò)程耦合、硝化與黑暗固碳耦合的生理生態(tài)學(xué)機(jī)制，建立了硝化菌群支撐的C−N、物質(zhì)與能量轉(zhuǎn)換的計(jì)量學(xué)關(guān)系，量化了深海硝化過(guò)程對(duì)深海生物圈及全球海洋碳循環(huán)的貢獻(xiàn)和影響。該工作為深海物質(zhì)與能量循環(huán)研究提供了新的參數(shù)，對(duì)深入認(rèn)識(shí)深海生物地球化學(xué)過(guò)程具有重要意義。

項(xiàng)目成果/簡(jiǎn)介:浮游植物在表層獲取光能固定CO2，形成顆粒有機(jī)碳（POC）往下沉降，在深海再礦化后生成銨（NH4+），從而為深海化能自養(yǎng)細(xì)菌/古菌提供了能量來(lái)源。因此，氨氧化古菌和亞硝氧化細(xì)菌所介導(dǎo)的兩步硝化過(guò)程是實(shí)現(xiàn)光能傳遞到深海被利用的重要途徑，是深海重要的供能過(guò)程，支撐了海洋“黑暗固碳”——不依賴于光合作用的化能自養(yǎng)固碳，為深海生物圈提供了“新”的有機(jī)質(zhì)，同時(shí)積累硝氮。由于亞硝氧化菌群研究的長(zhǎng)期滯后，氨氧化和亞硝氧化功能群在深海的協(xié)作關(guān)系始終不明了，因此國(guó)際上對(duì)深海硝化菌群支撐的碳（C）?氮（N）耦合機(jī)理（定性）的理解仍極為有限，對(duì)C?N計(jì)量學(xué)關(guān)系（定量）的準(zhǔn)確估算仍是空白。 該研究工作結(jié)合多組學(xué)分析、生理學(xué)實(shí)驗(yàn)、現(xiàn)場(chǎng)原位速率及動(dòng)力學(xué)觀測(cè)和模擬，以及生態(tài)系統(tǒng)模型，闡釋了氨氧化古菌和亞硝氧化細(xì)菌顯著差異的代謝策略，及兩步氧化過(guò)程耦合、硝化與黑暗固碳耦合的生理生態(tài)學(xué)機(jī)制，建立了硝化菌群支撐的C?N、物質(zhì)與能量轉(zhuǎn)換的計(jì)量學(xué)關(guān)系，量化了深海硝化過(guò)程對(duì)深海生物圈及全球海洋碳循環(huán)的貢獻(xiàn)和影響。該工作為深海物質(zhì)與能量循環(huán)研究提供了新的參數(shù)，對(duì)深入認(rèn)識(shí)深海生物地球化學(xué)過(guò)程具有重要意義。

本成果總體達(dá)到同類研究的國(guó)際先進(jìn)水平，在獸醫(yī)微生物菌毒種資源規(guī)范性描述方 面處于國(guó)際領(lǐng)先水平，在獸醫(yī)微生物菌毒種資源的篩選和創(chuàng)新性應(yīng)用等方面處于國(guó)際先 進(jìn)水平。本成果于2009年獲得成果鑒定證書(shū)，獲得2010年度山東省科技進(jìn)步獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)。 本成果分離鑒定了具有平臺(tái)資源號(hào)的280株細(xì)菌。其中，大腸桿菌80株，金黃色葡 萄球菌30株，豬鏈球菌50株，雞傷寒沙門(mén)氏菌103株，特殊菌株17株。分離鑒定了186株 病毒，其中NDV 60株，豬繁殖與呼吸綜合征病毒50株，犬瘟熱病毒3株，豬傳染性胃腸 炎病毒10株，豬流感病毒3株，禽流感病毒20株，雞傳染性支氣管炎病毒20株，雞傳染 性法氏囊病毒20株。對(duì)分離、收集和整理以前所保藏的菌毒種等方式獲得的33種3444株 菌毒種進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化整理整合，完成了相應(yīng)菌毒種種資源數(shù)據(jù)信息（包括個(gè)性信息和共性 信息）的采集、錄入、上報(bào)，完成280幅圖像信息采集、整理、上報(bào)，完成101株菌（毒） 種資源16SrRNA或病毒資源部分核酸序列的測(cè)定、上報(bào)。并向國(guó)家獸醫(yī)微生物菌種保藏 管理中心國(guó)家獸醫(yī)微生物標(biāo)準(zhǔn)菌種保藏庫(kù)上交了1621株菌（毒）種，實(shí)現(xiàn)了獸醫(yī)微生物 菌毒種資源的信息及實(shí)物共享。起草了“布魯氏桿菌菌種資源描述規(guī)范”和“牛結(jié)核桿 菌資源檢測(cè)技術(shù)規(guī)程”，驗(yàn)證完善了“結(jié)核桿菌菌種資源檢測(cè)技術(shù)規(guī)程及試點(diǎn)應(yīng)用”等 9個(gè)獸醫(yī)微生物資源檢測(cè)技術(shù)規(guī)程。制定了“犬瘟熱診斷技術(shù)”的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)分離的 部分菌毒株進(jìn)行生物學(xué)特性研究，為相關(guān)單位的科學(xué)研究提供了優(yōu)良菌毒種。