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本發(fā)明涉及一種利用噬菌體PhiX174的E基因和葡萄球菌核酸酶A基因轉(zhuǎn)化制備鴨疫里默氏菌前菌影疫苗的方法與應(yīng)用方法。該方案首先將噬菌體PhiX174的E基因和葡萄球菌核酸酶A基因通過(guò)柔性連接臂(Gly4Ser)3連接成串聯(lián)基因，并進(jìn)一步構(gòu)建溫控表達(dá)載體pBV-E-SN。將pBV-E-SN電擊轉(zhuǎn)化進(jìn)入鴨疫里默氏菌原生質(zhì)體，篩選陽(yáng)性克隆28℃增菌培養(yǎng)。分離菌體加保護(hù)劑后分裝、冷凍干燥。本發(fā)明所制備的活菌疫苗經(jīng)飲水免疫，既可以刺激呼吸道和消化道黏膜的局部免疫，也可以激發(fā)體液免疫。

目前該產(chǎn)品已應(yīng)用于腹腔術(shù)后及周?chē)窠?jīng)修復(fù)手術(shù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，效果良好。 本項(xiàng)目利用已有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)-分子定向進(jìn)化 的高效表皮生長(zhǎng)因子（ eEGF）為功能基因表達(dá)序 列，采用上游調(diào)控序列改造和多拷貝策略構(gòu)建葉綠 體表達(dá)載體，轉(zhuǎn)化和篩選優(yōu)良的塔胞藻，作為海洋 生物反應(yīng)器。在集成高效表達(dá)技術(shù)、代謝工程調(diào) 控、蛋白質(zhì)分離和純化四級(jí)技術(shù)平臺(tái)基礎(chǔ)上，實(shí)現(xiàn) 重組eEGF的高效表達(dá)和生產(chǎn)。進(jìn)而結(jié)合全新的海綿 狀膠體成膜技術(shù)，將含有eEGF充分吸附到海綿狀膠 體膜囊腔中，起到抗揮發(fā)、控釋緩釋的強(qiáng)效作用， 其整合了新穎的精準(zhǔn)皮膚營(yíng)養(yǎng)和修復(fù)和先進(jìn)的生物 工藝學(xué)技術(shù)，可大幅度提升企業(yè)在新興產(chǎn)業(yè)鏈上的 輻射產(chǎn)品自主創(chuàng)新能力和國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)力。

        技術(shù)成熟度：技術(shù)突破         目前的潮流能發(fā)電機(jī)組以直驅(qū)液壓變槳及帶變速箱的液壓變槳為主，其發(fā)電機(jī)和變速箱均采取機(jī)械動(dòng)密封方式進(jìn)行密封防水處理，海洋環(huán)境下，機(jī)械動(dòng)密封的可靠性和運(yùn)行效率往往沖突，密封層級(jí)多運(yùn)行阻力大，效率低，密封層級(jí)少，密封可靠性差，機(jī)組的運(yùn)行可靠性大大降低。光伏、波浪、海流一體化集成發(fā)電，波浪能與海流能水輪機(jī)對(duì)轉(zhuǎn)并通過(guò)磁力耦合驅(qū)動(dòng)發(fā)電機(jī)增速，具有多能互補(bǔ)、高效獲能、轉(zhuǎn)換效率高、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、運(yùn)行可靠等特點(diǎn)，為規(guī)模化海洋能開(kāi)發(fā)提供創(chuàng)新型設(shè)計(jì)。         意向開(kāi)展成果轉(zhuǎn)化的前提條件：中試放大及產(chǎn)業(yè)化工藝開(kāi)發(fā)資金支持

茶葉是我國(guó)重要的農(nóng)產(chǎn)品之一， 也是傳統(tǒng)的大宗出口商品。在茶葉種植中，以氯氝菊酣為主

460mm×190mm×200mm，圓片尺寸φ120mm。光路中的遮光片可上下、左右、前后移動(dòng)，帶光源。在室內(nèi)一般光照環(huán)境能使用。

成果與項(xiàng)目的背景及主要用途： 菌糠是指以棉籽殼、木屑、稻草、玉米芯、甘蔗渣及多種農(nóng)作物秸稈、工業(yè) 廢料（如酒糟、醋糟、造紙廠(chǎng)廢液及制藥廠(chǎng)黃漿廢液等）為主要原料栽培食用菌 后的廢棄培養(yǎng)基。菌糠主要含有物質(zhì)是纖維素、半纖維素、木質(zhì)素、抗?fàn)I養(yǎng)因子 和少量的蛋白質(zhì)，這些原料作為培養(yǎng)基栽培食用菌后，通過(guò)食用菌菌體的生物固 氮作用、酶解作用等一系列生物轉(zhuǎn)化過(guò)程，粗蛋白質(zhì)、粗脂肪含量均比不經(jīng)過(guò)食 用菌發(fā)酵前提高二倍以上，纖維素、半纖維素、木質(zhì)素等均已被不同程度的降解， 其中粗纖維素降低了 50%以上，木質(zhì)素降低 30%以上，棉酚降低 60%以上，同 時(shí)還產(chǎn)生了多種糖類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)和生物活性物質(zhì)。據(jù)報(bào)道，我國(guó)菌糠年產(chǎn)量在 200 萬(wàn)噸以上大部分當(dāng)作廢料而被浪費(fèi)掉，給環(huán)境造成了很大的污染，一些菌糠 可以被用作畜禽飼料，并且用廢棄菌糠來(lái)改良土壤可以做到廢物利用、改善環(huán)境， 實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。 我國(guó)土壤絕大部分嚴(yán)重缺磷、缺鉀，化學(xué)肥料中的磷元素和鉀元素在施肥后 很快被固化，不再能夠被植物使用。解磷菌、解鉀菌及固氮菌是生物益生菌肥中 的主要菌株，使用這些土壤益生菌可以提高土壤中植物可利用氮磷鉀的利用率。 如果能夠利用廢棄菌糠大規(guī)模培養(yǎng)這三種菌，制備成為生物菌肥，將會(huì)極大的增 211天津大學(xué)科技成果選編 加菌糠做為肥料的優(yōu)勢(shì)。本項(xiàng)目利用菌糠培養(yǎng)解磷菌、解鉀菌、固氮菌，制備成 為生物菌肥，預(yù)期產(chǎn)生極大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。 技術(shù)原理與工藝流程簡(jiǎn)介： 本項(xiàng)目擬利用處理后的廢棄菌糠殘?jiān)囵B(yǎng)酵母、解磷菌、解鉀菌、固氮菌， 優(yōu)化發(fā)酵條件，提高菌體量，獲得制備微生物菌肥的最佳工藝路線(xiàn)。 天津大學(xué)從農(nóng)業(yè)廢棄物堆肥中篩選出 7 株解磷能力較強(qiáng)的菌株，其中菌株 FL7 表現(xiàn)出較好的解磷效果，F(xiàn)L7 解磷量為 436.63mg/L。該菌株已經(jīng)于 2010 年 7 月 13 日在中國(guó)微生物菌種保藏中心進(jìn)行保藏（保藏號(hào)：CGMCC NO.4008）。 本課題組還從農(nóng)業(yè)廢棄物堆肥中篩選得到解鉀菌 K3、固氮菌 N1。解鉀菌 K3 解 鉀量達(dá) 4.10mg/L、固氮菌 N1 固氮量為 1.81×10—2mol/L。 另外，天津大學(xué)已經(jīng)建立了以菌糠為基質(zhì)培養(yǎng)解磷、解鉀、固氮菌的發(fā)酵條 件，經(jīng)過(guò)發(fā)酵條件優(yōu)化，制備的菌肥中三種菌的含量達(dá)到 48.62×108CFU/g，其 中解磷菌 2.4×108cfu/g，解鉀菌 25.22×108cfu/g，固氮菌 21×108cfu/g，均遠(yuǎn)高于 國(guó)標(biāo)。 應(yīng)用領(lǐng)域：生物、農(nóng)業(yè)領(lǐng)域 合作方式及條件：具體面議

有很高的食用和藥用價(jià)值，是我國(guó)傳統(tǒng)的藥用真菌之一。其鮮嫩醇香，肉 質(zhì)細(xì)嫩、潔白如玉、口感獨(dú)特、生熟皆可食、食藥兩用、營(yíng)養(yǎng)豐富。雞樅菌中 含有麥角甾醇類(lèi)物質(zhì)及治療糖尿病的有效成份，對(duì)降低血糖有明顯效果。并有 抑制人體癌細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。 

成果簡(jiǎn)介： 一種純化蠟樣芽孢桿菌發(fā)酵液中抑菌蛋白的方法這一專(zhuān)利利用自主篩選鑒定的蠟樣芽孢桿菌Bacillus cereus(CGMCC.4348)，通過(guò)微生物發(fā)酵培養(yǎng)出蠟樣芽孢桿菌發(fā)酵液，并利用硫酸銨分級(jí)沉淀方法提取出抑菌蛋白粗品；再利用葡聚糖凝膠柱來(lái)進(jìn)一步純化抑菌蛋白粗品，并將其對(duì)真菌病害進(jìn)行抑菌活性檢測(cè)。本發(fā)明操作方便、工藝簡(jiǎn)單、成

一、成果簡(jiǎn)介 “雙歧桿菌胞外多糖結(jié)構(gòu)鑒定、功能評(píng)價(jià)及活性產(chǎn)品的研制”受到國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863 項(xiàng)目)項(xiàng)目(編號(hào)：2008AA10Z324)與國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào)：2006BABO4A06)的資助。該研究以我國(guó)廣西巴馬百歲以上長(zhǎng)壽老人腸道分離到的雙歧桿菌及其胞外多糖(EPS)為材料，較系統(tǒng)、全面地進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定、功能評(píng)價(jià)及活性產(chǎn)品的研制。