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本發(fā)明提供了一種從紅豆杉中培養(yǎng)篩選產(chǎn)紫杉醇菌的方法.本發(fā)明的方法包括以下步驟:1)對(duì)紅豆杉植物的組織進(jìn)行培養(yǎng),分離純化獲得內(nèi)生真菌;2)培養(yǎng)步驟1)中獲得的內(nèi)生真菌,利用薄層層析對(duì)發(fā)酵代謝物進(jìn)行初篩,篩出可產(chǎn)紫杉醇或其類似物的菌株;3)結(jié)合細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn),測(cè)定出代謝物對(duì)CHO細(xì)胞的抑制率;4)利用高效液相色譜對(duì)其作了進(jìn)一步分析,確定產(chǎn)紫杉醇菌株.本發(fā)明提供的從紅豆杉分離產(chǎn)紫杉醇的方法過(guò)程簡(jiǎn)單,成本較低.并且通過(guò)本發(fā)明提供的方法提取得到的產(chǎn)紫杉醇菌用于微生物培養(yǎng)時(shí),獲得紫杉醇的含量大大增加,該方法為微生物工程提供了更廣闊的途徑.

毛蕊花糖苷是一種控糖療效非常 優(yōu)良的α-葡萄糖苷酶抑制劑。本技術(shù)成果通過(guò)篩選、誘導(dǎo)獲 得一株β-葡萄糖苷酶高產(chǎn)菌株，通過(guò)高效催化將松果菊苷轉(zhuǎn) 化為毛蕊花糖苷，經(jīng)萃取、分離，獲得純度超過(guò)50%及90%的 毛蕊花糖苷單體化合物。藥理學(xué)研究表明，毛蕊花糖苷中試產(chǎn) 品對(duì)降低2型糖尿病模型小鼠空腹血糖值及提高胰島素濃度和胰島素敏感性效果顯著；

本項(xiàng)目獲國(guó)家科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)、中國(guó)專利獎(jiǎng)優(yōu)秀獎(jiǎng)，江蘇省專利獎(jiǎng)金獎(jiǎng)等； 十一五國(guó)家科技支撐立項(xiàng)。 項(xiàng)目簡(jiǎn)介 以玉米芯為原料，采用蒸汽爆破、酶解、集成膜分離（微濾除雜、納濾脫鹽、 超濾脫色、納濾濃縮）技術(shù)制備低聚木糖，得到低聚木糖含量（對(duì)總糖）為>70% 和>90%的兩種型號(hào)的糖漿和糖粉產(chǎn)品，其中木二糖~木四糖含量≥70%。生產(chǎn)成本 為 60000 元/噸，顯著低于國(guó)內(nèi)外同類產(chǎn)品。項(xiàng)目技術(shù)具有節(jié)能、高效、環(huán)保的 優(yōu)點(diǎn)，生產(chǎn)線居國(guó)內(nèi)外領(lǐng)先水平。已先后在新疆、山東等地實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，最 大規(guī)模為年產(chǎn) 2000 噸低聚木糖

其他成果/n一種從柚子皮中提取醇溶糖的方法，包括如下步驟：1)以干燥、粉碎的柚子皮為原料，以乙醇水溶液為溶劑，在室溫下進(jìn)行浸提，過(guò)濾后得濾餅和浸提液；2)浸提液經(jīng)減壓旋轉(zhuǎn)濃縮得濃縮液；3)上大孔樹(shù)脂柱，將黃酮、色素類物質(zhì)吸附分離，用蒸餾水沖洗大孔樹(shù)脂柱，收集柱后有效餾分液；4)將柱后有效餾分液再次進(jìn)行減壓旋轉(zhuǎn)濃縮得初級(jí)醇溶糖產(chǎn)品，經(jīng)在?60℃～?105℃溫度條件下放置24h～72h和室溫真空干燥，得醇溶糖產(chǎn)品。本發(fā)明采用乙醇水溶劑進(jìn)行浸提，可避免蛋白質(zhì)等極性物的浸出；浸提液經(jīng)濃縮后，進(jìn)行大劑量上柱，可以去除黃酮和色素等物質(zhì)，得到產(chǎn)率較大、純度較高的醇溶糖；具有單批次處理量大，提取成本低的特點(diǎn)。

本項(xiàng)目通過(guò)過(guò)量表達(dá)氨基葡萄糖合成酶基因(glmS)、氨基葡萄糖乙酰化酶基 因(gna1)、敲除丙酮酸激酶基因(pykF)、甘露糖磷酸轉(zhuǎn)移系統(tǒng)編碼基因(manX)以及乙酰氨基葡萄糖磷酸轉(zhuǎn)移系統(tǒng)編碼基因(nagE)，構(gòu)建了一株可高效合成 N-乙酰氨基葡萄糖的大腸桿菌。并在此基礎(chǔ)上通過(guò)分階段葡萄糖流加和溶氧控制等技 術(shù)，建立了一種重組大腸肝菌發(fā)酵生產(chǎn)氨基葡萄糖的新工藝，并進(jìn)行了發(fā)酵過(guò)程中試放大及產(chǎn)品提取與化研究，顯著提高了大腸肝菌發(fā)酵生產(chǎn)氨基葡萄糖的產(chǎn) 量與生產(chǎn)強(qiáng)度，在 7-L 發(fā)酵罐上氨糖產(chǎn)量達(dá)到 120g/L，在 100-L 發(fā)酵罐上產(chǎn)量達(dá)到 90g/L。 

研發(fā)階段/n目前國(guó)內(nèi)外口香糖膠基大多數(shù)為橡膠材料和樹(shù)脂膠基。這類膠基廢棄之后具有很強(qiáng)的粘性，難以從地面、桌椅或其他公共場(chǎng)所、公共設(shè)施上清除，而且在自然界中難以降解（100年以上才能降解），因而產(chǎn)生一系列的環(huán)境污染。據(jù)媒體報(bào)道：2002年國(guó)慶節(jié)期間，北京市環(huán)衛(wèi)局不得不出動(dòng)十幾萬(wàn)人次的清潔工，花費(fèi)一周時(shí)間集中"清剿"天安門(mén)廣場(chǎng)上的六十多萬(wàn)個(gè)口香糖殘跡（據(jù)估計(jì)，清除一個(gè)口香糖殘跡就要耗費(fèi)一塊多錢(qián)）。由此可見(jiàn)，如何有效地解決口香糖的污染問(wèn)題已成為各級(jí)政府部門(mén)急需解決的一個(gè)難題。因此，需要研制一種廢棄以后，能

功能性糖(醇)(如木糖(醇)、麥芽糖(醇)、山梨醇、阿拉伯糖、甜菊糖等)是一類具有低熱值、防齲齒、調(diào)節(jié)血糖和預(yù)防便秘等功效的營(yíng)養(yǎng)性甜味劑。傳統(tǒng)功能性糖(醇)生產(chǎn)工藝存在：1）結(jié)晶收率偏低<50%；2）母液中糖組分未得到有效利用；3）分離純化工藝多采用等電點(diǎn)沉淀、離交等方法，工藝復(fù)雜、提取率低，大量使用酸堿，產(chǎn)生三廢、嚴(yán)重污染環(huán)境。江蘇省工業(yè)色譜分離工程技術(shù)研究中心自主研發(fā)的各種糖(醇)特種色譜固定相、模擬移動(dòng)床色譜分離純化技術(shù)及裝備，可實(shí)現(xiàn)功能性糖(醇)的清潔化、自動(dòng)化的工業(yè)生產(chǎn)，同時(shí)可分離提取多種組分，三廢污染零排放，處于國(guó)內(nèi)領(lǐng)先水平，已在國(guó)內(nèi)外多家企業(yè)及科研單位推廣應(yīng)用。 

葡萄糖二酸是一種重要的化合物，在醫(yī)療和工業(yè)中有著廣泛的應(yīng)用。目前生產(chǎn)葡萄糖二酸的方法主要以化學(xué)法-葡萄糖化學(xué)氧化法為主，但該方法具有選擇性低、成本高、得率低、要高溫及產(chǎn)生大量氧化反應(yīng)副產(chǎn)物不利于后續(xù)葡萄糖二酸的分離等局限性。目前生物法合成葡萄糖二酸主要是在大腸桿菌中進(jìn)行的，但在大腸桿菌中異源合成葡萄糖二酸被許多因素限制。釀酒酵母因具有耐酸能力強(qiáng)、耐低溫、可低 pH 發(fā)酵、沒(méi)有噬菌體感染、適合大規(guī)模發(fā)酵、易分離和高抗逆性等特點(diǎn)，已被廣泛用于產(chǎn)有機(jī)酸的研究，因此釀酒酵母比大腸桿菌更適合葡萄糖二酸的生產(chǎn)并具有更高的工業(yè)應(yīng)用價(jià)值。利用釀酒酵母合成葡糖二酸具有很好的應(yīng)用前景。 創(chuàng)新要點(diǎn) 1) 以釀酒酵母 BY4741 為出發(fā)菌株，將擬南芥的肌醇加氧酶 MIOX4 和丁香假單胞菌的 UDH 基因在 delta 重復(fù)序位點(diǎn)高效表達(dá)，敲除轉(zhuǎn)錄抑制因子OPI1 獲得工程菌 Bga-3，該菌株在分批補(bǔ)料發(fā)酵條件下能夠產(chǎn) 6 g/L 的葡萄糖二酸，為目前報(bào)道的最高值； 2) 通過(guò)提高工程菌的轉(zhuǎn)運(yùn)胞外肌醇的能力和工程菌自身合成肌醇的能力，解決提高葡萄糖二酸產(chǎn)量的關(guān)鍵問(wèn)題； 3) 進(jìn)一步協(xié)調(diào)肌醇用于細(xì)胞自身代謝活動(dòng)和葡萄糖二酸合成之間的分配關(guān)系，并通過(guò)提高葡萄糖二酸合成途徑效率和發(fā)酵優(yōu)化，提高肌醇利用率和葡萄糖二酸合成的產(chǎn)量。 

成果與項(xiàng)目的背景及主要用途：化學(xué)結(jié)構(gòu)式： 用途：可治療急性或慢性風(fēng)濕、關(guān)節(jié)炎和關(guān)節(jié)病等源于骨關(guān)節(jié)組織代謝混亂 的疾病。也是降低膽固醇、消除運(yùn)動(dòng)疲勞的保健藥品。 技術(shù)原理與工藝流程簡(jiǎn)介：以天然產(chǎn)物甲殼素為原料，在鹽酸介質(zhì)中溶解并 水解為單分子葡萄糖胺、然后經(jīng)活性炭吸附、真空濃縮、降溫析出而制得葡萄糖 胺鹽酸鹽。葡萄糖胺鹽酸鹽經(jīng)堿溶解、硫酸轉(zhuǎn)化、再析出即生成葡萄糖胺硫酸鹽。 28天津大學(xué)科技成果選編 技術(shù)水平及專利與獲獎(jiǎng)情況：已完成實(shí)驗(yàn)室規(guī)模研究，產(chǎn)品質(zhì)量達(dá)到國(guó)外同 類產(chǎn)品水平，主要技術(shù)指標(biāo)如下： 外觀： 白色結(jié)晶粉末，無(wú)味。 硫酸根含量： 97.5～102.5％ 干燥失重： ( 0.5％ 灼燒殘?jiān)?23.8～25.7％ pH 值： 5.8～6.2（X＝K） 4.0～4.4（X＝Na） 重金屬： ( 10 ppm 鐵鹽： ( 10ppm 氯化物： ( 14％ 應(yīng)用前景分析及效益預(yù)測(cè)：目前，該產(chǎn)品國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)緊俏且主要出口，國(guó)內(nèi) 有生產(chǎn)廠家，但供不應(yīng)求。受原料供應(yīng)影響，產(chǎn)品價(jià)格有時(shí)波動(dòng)。本工藝設(shè)計(jì)簡(jiǎn) 便、易于操作、設(shè)備投資少、易于工業(yè)化、利潤(rùn)很高，有明顯的經(jīng)濟(jì)效益。建議 有甲殼素來(lái)源的沿海企業(yè)或生產(chǎn)甲殼素的企業(yè)投產(chǎn)該產(chǎn)品。若為后者，則可綜合 治理三廢，經(jīng)濟(jì)效益更好。 以 3.0 萬(wàn)/噸的甲殼素計(jì)，則葡萄糖胺硫酸鹽（復(fù)合鹽）原料成本可為 13.0 萬(wàn)/噸，工廠價(jià)約 16.0 萬(wàn)/噸，售價(jià) 19～20 萬(wàn)/噸，以年產(chǎn) 50 噸產(chǎn)品計(jì)，利稅可達(dá) 150 萬(wàn)元以上。若生產(chǎn)廠自己生產(chǎn)甲殼素，可明顯降低原料成本，則經(jīng)濟(jì)效益更 為可觀。 最近國(guó)內(nèi)有企業(yè)正在以藥品申請(qǐng)批號(hào)，因此國(guó)內(nèi)需求量會(huì)大增。 應(yīng)用領(lǐng)域：藥物及保健品。 技術(shù)轉(zhuǎn)化條件（包括：原料、設(shè)備、廠房面積的要求及投資規(guī)模）： 生產(chǎn)規(guī)模及產(chǎn)量：以年產(chǎn) 50 噸葡萄糖胺硫酸鹽為宜。 所需廠房面積：300 m2。 主要設(shè)備：酸解釜、濃縮釜、貯罐、冷凝器、水環(huán)真空泵、真空濾槽，酸堿 轉(zhuǎn)化釜、冷凍設(shè)備。 主要原材料及來(lái)源：全部為國(guó)產(chǎn)原料如甲殼素、鹽酸、活性炭、丙酮，氫氧 29天津大學(xué)科技成果選編 化鉀、硫酸。 設(shè)備投資：設(shè)備投資約 80 萬(wàn)元。 總投資：依生產(chǎn)廠具體情況而定。 合作方式及條件：面議。 

天然黃酮、功能糖的提取制備與功能產(chǎn)品開(kāi)發(fā)   1、核心技術(shù)介紹： 多糖（polysaccharide）是由多個(gè)單糖分子縮合、失水而形成的由糖苷鍵結(jié)合的糖鏈，是一類分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜且龐大的高分子碳水化合物。多糖組成與結(jié)構(gòu)十分復(fù)雜，不是一種純粹的化學(xué)物質(zhì)，而是聚合程度不同的物質(zhì)的混合物。多糖是一類具有廣泛生物活性的生物大分子，具有多種藥理活性，如抗氧化、降血糖、降血脂、抗腫瘤以及增強(qiáng)免疫力等，具有較高的開(kāi)發(fā)價(jià)值。植物多糖種類繁多，具有多途徑和多靶點(diǎn)作用等優(yōu)勢(shì)，在保健食品和醫(yī)藥等方面具有廣闊的應(yīng)用前景。掌葉覆盆子(拉丁名：Rubus chingii Hu)，又稱華東覆盆子、大號(hào)角公、牛奶母等，薔薇科懸鉤子屬植物，分布于江蘇、安徽、浙江、江西、福建，等地。未成熟果實(shí)可入藥，《中國(guó)藥典》記載其性微溫，味甘、酸，入肝腎經(jīng)，具補(bǔ)肝腎、縮小便、助陽(yáng)固精，明目之功效，主治陽(yáng)痿、遺精、虛勞、目暗等癥。覆盆子的營(yíng)養(yǎng)成分豐富，富含鞣花酸、維生素、多糖、多酚、黃酮等功能性化合物。其中，覆盆子多糖具有廣泛的藥理作用，如抗氧化、抗衰老、降壓、提高免疫力等功效。然而目前覆盆子多糖提取純化步驟復(fù)雜；同時(shí)因采用堿法提純，易破壞多糖的結(jié)構(gòu)，多糖損失較大。有研究通過(guò)聚酰胺柱和DEAE—纖維素陰離子柱純化多糖，然而通過(guò)柱純化的步驟繁雜，且原材料價(jià)格昂貴。目前，尚未發(fā)現(xiàn)高純度掌葉覆盆子多糖的快速提取方法。為更好地對(duì)覆盆子多糖進(jìn)行開(kāi)發(fā)利用，項(xiàng)目團(tuán)隊(duì)綜合利用超微粉碎、超聲輔助浸提、分子截留和真空冷凍干燥等技術(shù)，制備獲得高純度、高活性掌葉覆盆子多糖，為掌葉復(fù)盆子多糖的產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用提供技術(shù)支撐。項(xiàng)目完成人團(tuán)隊(duì)在天然黃酮和植物多糖分離純化及其調(diào)控糖脂代謝、緩解氧化應(yīng)激、保護(hù)肝臟損傷等領(lǐng)域累計(jì)申請(qǐng)發(fā)明專利40余件，其中授權(quán)發(fā)明專利14件，2項(xiàng)PCT專利申請(qǐng)中。目前項(xiàng)目完成人研究團(tuán)隊(duì)在涉及植物化學(xué)素分離純化領(lǐng)域到活性應(yīng)用已經(jīng)形成了國(guó)內(nèi)外全覆蓋專利群，通過(guò)全球?qū)＠季郑行ПＷo(hù)了該核心自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)。 2、應(yīng)用范圍及目前應(yīng)用狀態(tài) 本項(xiàng)目研發(fā)的基于超微粉碎、超聲輔助浸提、分子截留和真空冷凍干燥等技術(shù)的快速、高純度植物多糖提取技術(shù)適用于富含多糖的植物農(nóng)產(chǎn)品，包括但不限于如下產(chǎn)品：掌葉復(fù)盆子、蓮霧、桑葚、紅棗和香菇等。目前已建立植物多糖的中試生產(chǎn)線，可完成小批量植物多糖的生產(chǎn)，開(kāi)發(fā)以植物多糖為核心元素的功能產(chǎn)品。 3、掌葉復(fù)盆子多糖結(jié)構(gòu)及活性介紹 活性多糖是指具有某種特殊生理活性的多糖化合物，具有雙向調(diào)節(jié)人體生理節(jié)奏的功能，廣泛存在于植物和微生物細(xì)胞壁中，安全性高、功能廣泛，具有非常重要與特殊的生理活性，是由醛基和羰基通過(guò)苷鍵連接的高分子聚合物，也是構(gòu)成生命的四大基本物質(zhì)之一。多糖除有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤生物學(xué)效應(yīng)外, 還有抗衰老、降血糖、抗凝血等作用, 且對(duì)機(jī)體毒副作用小。本項(xiàng)目開(kāi)發(fā)的掌葉覆盆子多糖主要由半乳糖醛酸組成，以1,3-阿拉伯糖、1,6-半乳糖、T-半乳糖醛酸等糖苷鍵組成，具有抗氧化、抑制脂肪毒性和肝臟損傷等功能活性，具有良好的開(kāi)發(fā)前景，本項(xiàng)目研究為掌葉覆盆子多糖提供了新的醫(yī)療用途，拓展了新的應(yīng)用領(lǐng)域。 以摩爾百分比計(jì)，掌葉覆盆子多糖由以下成分組成： 半乳糖醛酸    40.26~45.20%； 阿拉伯糖      29.78~33.17%； 半乳糖        7.63~9.59%； 葡萄糖        6.38~9.65%； 甘露糖        1.18~1.31%； 鼠李糖        3.29~4.89%； 葡糖醛酸      0.98~1.13%； 巖藻糖        0.27~0.65%； 多糖是由單糖以一定的連接方式組成的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元，單糖以一定的糖苷鍵連接，不同糖苷鍵的連接的單糖稱為多糖的結(jié)構(gòu)單位。以摩爾比計(jì)，掌葉覆盆子多糖由以下特定結(jié)構(gòu)單位組成： 1,3-阿拉伯糖    2.49-2.96； 1,6-半乳糖       2.22-2.34； T-半乳糖醛酸    1.76-2.01； 1,6-葡萄糖       1.15-1.27； 1,4 -半乳糖醛酸 1.17-1.26； 1,4,6-半乳糖      1.03-1.21； 1,4-鼠李糖       0.75-1.00； 1,2-阿拉伯糖    0.59-0.80； 1,4-阿拉伯糖    0.48-0.67； T-阿拉伯糖       0.36-0.59； T-葡萄糖醛酸    0.13-0.30； 1,3-巖藻糖       0.18-0.29； 1,3-甘露糖       0.18-0.28； 1,4-葡萄糖醛酸   0.13-0.24。   掌葉覆盆子（Rubus chingii Hu）