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本發明涉及一種快速鑒定扇貝品種的多重PCR引物及方法。快速鑒定扇貝品種的多重PCR引物，由櫛孔扇貝引物、華貴櫛孔扇貝引物、海灣扇貝引物和蝦夷扇貝引物組成。鑒定方法包括以下步驟：提取扇貝基因組總DNA，進行多重PCR擴增，根據瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR產物大小判定待檢測扇貝種類。本發明的鑒定引物及多重PCR方法可以靈敏、快速地確定待檢測扇貝樣品的種類。

本成果以專利形式體現（專利號 201310723968.2 ），生命科學大多以微生物為研究對象，有很多物種都是近緣的，無法用普通方法區分，本方法通過 PCR 方法可以快速區分，建立了一種設計特殊引物的方法。

本發明公開了一種用于檢測水貂星狀病毒的RT?PCR引物及其檢測方法，參照GenBank收錄的水貂星狀病毒ORF1b基因序列(序列號分別為GU985458.1、NC_004579.1、AY179509.1)保守區，分析設計一對特異性引物，根據設計的引物，探索最佳反應體系和反應條件，建立RT?PCR檢測方法，并進行特異性試驗、敏感性試驗、重復性試驗。結果表明建立的水貂星狀病毒RT?PCR方法敏感性強，特異性高，能夠快速的檢測水貂星狀病毒。本發明所建立的RT?PCR檢測方法具有很好的應用性，能夠用于水貂星狀病毒的檢測。

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本發明涉及到一種多重PCR-反向斑點雜交技術檢測結核分枝桿菌耐藥性的方法,即是一種基于多重PCR的反向斑點雜交技術檢測結核分枝桿菌耐藥性的方法,包括了引物的設計、探針的設計、雜交試驗、結果判定,能夠同時檢測結核分枝桿菌對RIF、INH和EMB三種藥的耐藥性,大大縮短了檢測的時間,結果可靠。

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項目成果/簡介:聚合酶鏈式反應（Polymerase Chain Reaction，PCR）是一種用來快速擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，可用于生物體外進行特殊DNA復制。該技術被廣泛應用在刑偵、醫學、生物學研究等多個領域，在基因工程技術中更是有著無法替代的重要作用。作為PCR擴增反應的重要儀器，PCR儀是DNA擴增的各種生產、研究的必要基礎工具。其應用前景將隨著基因工程和基因技術的發展而不斷擴展。 所研發的PCR生物儀器具有低成本、高精度、高穩定性、溫度變化迅速、可調溫度梯度大等特點。其加熱系統采用了多模塊分區加熱的模式，通過加熱模塊的協調工作，可實現系統準確的分區域、分時段精確控制，工作過程中可實現20℃以上的溫度梯度。溫度控制系統采用了自適應模糊控制方法，通過控制參數的實時調整，實現了溫度控制對于使用環境的自適應，從而提高了系統對于環境條件、自身熱量積累、系統自身溫度變化等干擾的抵抗能力，增強了系統溫度控制的準確性和精度，溫度控制精度可達0.3℃。同時，利用分環節溫度控制設計，解決了溫度變化時反饋溫度不準確的問題，通過基座溫度的適當超調，提高了控制目標溫度的響應速度，即使在接近目標溫度時，加熱速率依舊可保持1.5℃/s以上，且能夠保證目標溫度無超調。應用范圍:該項目產業化預期能夠實現巨大的社會價值和經濟價值。其產業化不僅能夠填補國產高精度梯度PCR生物儀器的市場空白，同時還能夠促進我國基因工程技術的發展。 目前，該項目已經初步實現循環過程中的溫度高精度控制。在實驗條件下完成了20℃的溫度梯度自適應驗測試，實現了0.3℃的控制精度要求。項目即將進入深入開發測試、模型樣機試制和細節參數優化階段。 本項目成果具有完全自主知識產權，具有良好的市場推廣價值，可考慮實施多種推廣方式相結合的方式。以技術開發、技術服務為主體，在成果轉化的同時，結合市場反饋信息，開展更深入的技術研發工作。項目階段:試驗階段效益分析:所研發的PCR生物儀器，具有和國內外一線產品比肩的性能，可滿足各種PCR擴增反應的生產、研究需求。在梯度模式下，能夠通過設置一系列的梯度退火溫度進行擴增，從而在一次PCR擴增中就可以篩選出表達量高的最適合退火溫度，應用于研究未知DNA退火溫度的擴增實驗時，可有效節省試驗時間、提高實驗效率。在不設置梯度的情況下亦可當作普通的高精度PCR儀使用。