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基因治療可用于包括癌癥、艾滋病、心血管病、傳染性疾病等在內(nèi)的各種獲得性和遺傳性疾病。近幾年來核酸及基因藥物得到快速發(fā)展，已有多個核酸藥物經(jīng)FDA批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床治療。基因治療相對其它治療方法有著若干優(yōu)勢，但在實際應(yīng)用過程中也面臨著一些挑戰(zhàn)。其中，基因輸送載體對于基因治療來說是十分關(guān)鍵。目前開發(fā)基因輸送載體的策略主要分為病毒和非病毒介導(dǎo)的輸送系統(tǒng)。病毒載體具有非常高的輸送效率并且可以保證基因的長期表達(dá)，因此是目前臨床上應(yīng)用最多的載體。但病毒載體在臨床使用過程中也暴露出了許多缺陷，這些缺陷大大限制了病毒載體的應(yīng)用。為了克服病毒載體的諸多不足，近些年來非病毒載體得到了迅速發(fā)展。這其中就包括研究最廣泛的非病毒載體聚乙烯亞胺。PEI是最好的體外轉(zhuǎn)染試劑之一并且已經(jīng)被一些研究工作者當(dāng)成聚合物類基因轉(zhuǎn)染試劑的“金標(biāo)準(zhǔn)”。 PEI的轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞毒性主要受其分子量、支化程度、表面電勢和粒徑的影響。隨著分子量的升高，支鏈PEI轉(zhuǎn)染效率升高；然而，細(xì)胞毒性也同時升高。為了消除或降低與PEI有關(guān)的細(xì)胞毒性，目前已經(jīng)發(fā)展出了多種不同的策略。這些策略主要包括使用直鏈高分子量PEI，用多糖、親水性聚合物（如PEG）、二硫鍵連接臂、脂質(zhì)基團(tuán)等取代或連接高分子量和低分子量的支鏈PEI市場上銷售的PEI分子量范圍非常廣泛，從1000 Da以下到1.6 × 103 kDa都有。 維生素E是一種脂溶性化合物，它包括生育酚和生育三烯酚，其中α-生育酚是自然界中分布最廣泛、含量最豐富并且活性最高的維生素E形式。維生素E的生物功能除了最熟知的抗氧化功能之外，還涉及酶活性的調(diào)節(jié)、基因表達(dá)調(diào)控以及神經(jīng)生物學(xué)功能等。通過消化道吸收進(jìn)入血漿的維生素E經(jīng)受體介導(dǎo)進(jìn)入肝細(xì)胞，進(jìn)入肝細(xì)胞的維生素E又在維生素E結(jié)合蛋白的運輸下進(jìn)入肝外組織。維生素E本身的疏水性質(zhì)、豐富的生物調(diào)節(jié)功能以及其受體介導(dǎo)的肝細(xì)胞攝取方式都預(yù)示著用它來修飾PEI有助于實現(xiàn)基因的器官靶向的遞送。 因此，我們開發(fā)了維生素E修飾的聚乙烯亞胺衍生物及其合成方法和應(yīng)用。維生素E的修飾有利于基因質(zhì)粒的包載、遞送和釋放，其毒性隨著PEI上的維生素E飾數(shù)目的增加而降低，維生素E的修飾能夠大大增加pDNA質(zhì)粒的細(xì)胞攝取后基因編碼蛋白的表達(dá)。動物體內(nèi)實驗表明PEI衍生物可成功將pDNA質(zhì)粒輸送到小鼠的肝臟和肺臟中，該復(fù)合物（PEI/pDNA）能進(jìn)入肝臟和肺臟細(xì)胞并進(jìn)一步釋放質(zhì)粒DNA和基因表達(dá)。本成果具有聚乙烯亞胺衍生物作為基因輸送載體具有毒性低、轉(zhuǎn)染效率高和基因藥物已釋放等優(yōu)點。

AH48全自動核酸提取工作站，基于上吸磁珠法提取純化核酸原理，整合振蕩式核酸提取純化與移液臂組合，實現(xiàn)大量樣本核酸的快速高效制備純化。工作站集試劑樣本自動加載，核酸提取，PCR體系構(gòu)建等諸多功能于一體，實現(xiàn)了全流程的自動化操作。整個工作過程無需人工干預(yù)。配合相應(yīng)的核酸提取試劑，可處理血清，血漿，全血，拭子，羊水，糞便，組織灌洗液，組織，石蠟切片，細(xì)菌，真菌等多種樣品類型，廣泛應(yīng)用于檢驗，疾病防控，動物檢疫，出入境檢驗檢疫，食品安全，法醫(yī)痕跡檢驗，科學(xué)教研等領(lǐng)域。 所提取出的高質(zhì)量核酸（DNA和RNA）可用于高靈敏的下游分析，如定量PCR、臨床分子診斷、基因表達(dá)分析、基因分析、法醫(yī)及傳染性疾病研究等；純化后的核酸可直接應(yīng)用于下一步的酶切、鑒定以及疾病診斷、治療等。

本項目首次實現(xiàn)了將核酸提取、核酸擴(kuò)增以及核酸檢測集成到同一試紙上，并最終實現(xiàn)了核酸從提取到檢測的集成化和小型化，成本低廉、操作簡便、檢測周期短，開發(fā)裝置已經(jīng)完成實驗室小試階段，產(chǎn)品原型已經(jīng)開發(fā)完成。填補(bǔ)紙的核酸檢測市場空白，用于真菌檢測的LAMP集成試紙的研發(fā)及產(chǎn)業(yè)化將具有非常巨大的市場前景。

目前適配體廣泛應(yīng)用的瓶頸為篩選技術(shù)效率低下，現(xiàn)有的篩選技術(shù)無法滿足科研以及產(chǎn)品對識別靶標(biāo)高親和、高特異性的需求。適配體篩選技術(shù)已成為適配體應(yīng)用發(fā)展的關(guān)鍵。

產(chǎn)品說明 NP-1096是一款在NP-2032基礎(chǔ)上進(jìn)行通量、性能全面升級的一臺全自動核酸提取儀，一次最高可處理96個樣本，同時能滿足大體積樣本的處理需 求。在配套不同種類試劑盒條件下，可從全血、病毒、組織、植物、細(xì)菌和培養(yǎng)細(xì)胞等多源性樣本中純化核酸。利用高通量處理模塊和快速優(yōu)質(zhì)試劑盒的優(yōu) 勢，可為客戶提供高效、自動化和高品質(zhì)的核酸純化處理解決方案，是大規(guī)模臨床基因分析需求的心儀設(shè)備。

1.產(chǎn)品簡介H32全自動核酸提取儀基于由磁棒架上的磁棒吸附磁珠，將磁珠移至不同的試劑槽內(nèi)。它可以應(yīng)用各類樣品的核酸與蛋白質(zhì)的提取，只需加檢測樣品和試劑與96深微孔板中，即可同時操作1-32個樣品。與傳統(tǒng)離心方式的手動操作比較，其核酸提取過程更簡單，且實現(xiàn)自動化?2.產(chǎn)品優(yōu)勢*10寸彩色觸摸顯示屏，圖形化、中英文界面，簡單易用，無需外接計算機(jī)，無需特殊培訓(xùn)*根據(jù)要求自定義溫度、程序，滿足不同試劑要求*操作時間短，15-40min/次，最多可同時提取32個樣品*核酸得率高，磁珠損耗少，結(jié)果重復(fù)性好*紫外消毒方式，實驗艙側(cè)風(fēng)扇混合動作時開啟，減少不同批次間樣品的污染*內(nèi)置照明設(shè)置：便于儀器工作時觀察運行狀態(tài)*開放式平臺，適用于各種磁珠法提取試劑*高通量，一次可處理32個樣本，節(jié)約時間*銅加熱塊，加熱溫度室溫至﹢99℃（裂解及洗脫位），以保證純化過程中的最佳反應(yīng)溫度*可編輯不同需求的震蕩混合速度*用戶可自由設(shè)置程序并可儲存200個用戶程序*外觀小巧，材質(zhì)堅固，設(shè)計壽命長*售后政策：自驗收合格之日起，整機(jī)（包括配件）1年保修（除人為因素?fù)p壞）

1.產(chǎn)品簡介H48全自動核酸提取儀，基于上吸磁珠法提取純化核酸原理，采用振蕩式核酸提取純化方式，實現(xiàn)大量樣本核酸的快速高效制備純化。配合相應(yīng)的核酸提取試劑，可處理血清，血漿，全血，拭子，羊水，糞便，組織灌洗液，組織，石蠟切片，細(xì)菌，真菌等多種樣品類型，廣泛應(yīng)用于檢驗，疾病防控，動物檢疫，出入境檢驗檢疫，食品安全，法醫(yī)痕跡檢驗，科學(xué)教研等領(lǐng)域。所提取出的高質(zhì)量核酸（DNA和RNA）可用于高靈敏的下游分析，如定量PCR、臨床分子診斷、基因表達(dá)分析、基因分析、法醫(yī)及傳染性疾病研究等；純化后的核酸可直接應(yīng)用于下一步的酶切、鑒定以及疾病診斷、治療等。

四川大學(xué)華西醫(yī)院實驗醫(yī)學(xué)科應(yīng)斌武教授帶領(lǐng)的臨床團(tuán)隊，與柯博文教授、耿佳教授科研團(tuán)隊緊密合作，聯(lián)合攻關(guān)，成功自主研發(fā)了。RT-PCR試劑盒已經(jīng)完成臨床樣本檢測470例（陽性14例，陰性456例），IgG/IgM抗體聯(lián)合檢測試劑盒已經(jīng)完成臨床樣本檢測40例（陽性15例，陰性25例），結(jié)果均達(dá)到國家衛(wèi)健委疾病預(yù)防控制局最新發(fā)布的《新型冠狀病毒感染的肺炎實驗室檢測技術(shù)指南》等相關(guān)檢測標(biāo)準(zhǔn)。RT-PCR檢測試劑盒以新型冠狀病毒ORFIab基因和N基因中的保守序列為靶位點設(shè)計特異性引物和寡核苷酸熒光探針，對病毒核酸進(jìn)行高特異性檢測，能夠排除其他冠狀病毒株的非特異性干擾，檢測靈敏度達(dá)到200 拷貝/毫升。該產(chǎn)品創(chuàng)新性構(gòu)建了防污染系統(tǒng)，有效降低了產(chǎn)物氣溶膠的污染。同時以假病毒為陽性對照，以人類看家基因為內(nèi)標(biāo)，對檢測過程進(jìn)行全面監(jiān)控，進(jìn)一步提高了產(chǎn)品的抗干擾能力。

一、項目分類 關(guān)鍵核心技術(shù)突破 二、技術(shù)分析 （1）本技術(shù)能夠在僅使用一種標(biāo)記探針(即,檢測探針)的情況下，實現(xiàn)對多種靶核酸序列的同時檢測(多重檢測)。 （2）本技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)對多種靶核酸序列的同時檢測(多重檢測),并且能夠同時檢測靶核酸序列的最大數(shù)目遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出了所使用的標(biāo)記探針(即,檢測探針)的數(shù)目。 因此，本技術(shù)提供了一種簡單、高效、低成本的多重檢測法。本技術(shù)能夠檢測的靶核酸序列的最大數(shù)目不受限于所使用的標(biāo)記探針(即,檢測探針)的數(shù)目；能夠基于相對有限數(shù)目的標(biāo)記探針(即,檢測探針)實現(xiàn)對顯著更多數(shù)量的靶核酸序列的同時檢測(多重檢測)，這是特別有利的。 對比國內(nèi)外同類技術(shù)，本技術(shù)的優(yōu)勢包括：①標(biāo)記過程極為方便且成本低。假設(shè)同樣需要識別15種高危型HPV，已商品化的實時PCR檢測試劑盒、已報道的多管實時PCR檢測體系、包括實時PCR熔解曲線技術(shù)均需要15條熒光探針進(jìn)行檢測。而本技術(shù)只需要4條熒光探針就可以完成15種高危型HPV的識別。②熔點溫度不會受待檢DNA序列的多態(tài)性位點或二級結(jié)構(gòu)的影響。傳統(tǒng)實時PCR技術(shù)和熔解曲線分析技術(shù)的檢測結(jié)果經(jīng)常會受到熒光探針覆蓋區(qū)的SNP或二級結(jié)構(gòu)的干擾。而本技術(shù)中熒光探針只與標(biāo)簽序列雜交，因此檢測獲得的熔點溫度可以保持恒定。③具備優(yōu)秀的兼容能力，一個熔點標(biāo)簽庫可以適用于不同領(lǐng)域多個對象的檢測，而且針對不同的檢測對象可以采用相同的檢測流程，試劑組份只需要更換雜交探針，設(shè)計上只需改動雜交探針的特異雜交序列。這種體系兼容能力大幅度縮短了新體系的研發(fā)時間。④判讀統(tǒng)一規(guī)范，易于在臨床應(yīng)用中推廣。目前大部分檢測技術(shù)針對不同的檢測對象需要建立不同的判讀標(biāo)準(zhǔn)。而本技術(shù)則可以像條形碼一樣標(biāo)記不同的檢測對象，因此較容易實現(xiàn)自動化判讀。

李天來院士團(tuán)隊許濤課題組在Science子刊發(fā)布植物器官脫落分子機(jī)制最新研究成果