用于檢測疾病相關(guān)標記物的化學發(fā)光免疫分析試劑盒
1 成果簡介本項成果針對目前全球共同關(guān)心的腫瘤、傳染病、內(nèi)分泌等重大疾病快速檢測問題,建立相關(guān)疾病診斷所需的高靈敏度化學發(fā)光免疫分析新方法,研制了一系列可用于臨床分析的化學發(fā)光免疫分析試劑盒。 所建立的方法操作簡單,線性范圍寬,成本低,可以實現(xiàn)大規(guī)模的樣品調(diào)查和篩選。本項成果包括基于磁顆粒的多種標志物的快速聯(lián)合檢測技術(shù),研制高通量、 快速臨床診斷試劑盒和全自動化學發(fā)光免疫分析儀的關(guān)鍵裝置。可以實現(xiàn)腫瘤、傳染病、內(nèi)分泌等系列化學發(fā)光免疫分析試劑的產(chǎn)業(yè)化。研究成果已部分應(yīng)用于臨床檢驗。2 應(yīng)用說明微板式磁化學發(fā)光酶免疫分析( MMCLEIA)方法。以磁性微粒子為載體,采用磁性微粒子表面包被技術(shù)和免疫反應(yīng)的特點,以磁性酶免疫測量分析為模型,建立了微板式磁化學發(fā)光酶免疫分析法。能夠較好地應(yīng)用于血清以及尿液中不同生物標記物成分的分析。 用改良的戊二醛交聯(lián)法完成堿性磷酸酶( ALP) 對抗體的標記,所得酶結(jié)合物保持了單克隆抗體的免疫反應(yīng)性和酶的催化活性。 采用 4-甲氧基-4-( 3"-磷酰氧基苯) -螺旋-( 1, 2-二氧雜環(huán)丁烷-3, 2'-金剛烷( AMPPD) -堿性磷酸酶( ALP) 化學發(fā)光體系,并以異硫氰酸熒光素( FITC) 和 ALP 分別標記疾病標記物的單克隆抗體。在溶液中形成 FITC 標記抗體-抗原-ALP 標記抗體的免疫夾心復合物后,引入偶聯(lián) FITC 抗體的微米級磁性微粒子作為反應(yīng)體系的分散固相,并最終形成雙夾心免疫復合物。在反復施加磁場的作用下,通過洗滌將沒有結(jié)合的游離蛋白與免疫復合物分離,實現(xiàn)對待測抗原的測定。 這一技術(shù)可以應(yīng)用于腫瘤標記物的檢測。3 效益分析化學發(fā)光免疫分析由于其高靈敏度、快速、高通量等特點,可以應(yīng)用于生物樣品的快速檢測,在臨床檢測、環(huán)境分析以及食品安全分析等領(lǐng)域一直受到人們的重視。本研究成果及專利技術(shù)均從實際需要出發(fā),不需要繁雜的樣品前處理,就可以更方便地檢測出人體或者環(huán)境生物樣品中相關(guān)物質(zhì)的含量,這種技術(shù)可以用于日常生產(chǎn)和生活中,對人類和動物的身體健康、維持全球生態(tài)平衡等方面具有很大的意義。微板式磁性微粒子化學發(fā)光免疫分析新技術(shù)的開發(fā)不僅為腫瘤、傳染病等重大疾病診斷與預防提供強有力的檢測工具,對于發(fā)展其他疾病診斷技術(shù)和環(huán)境雌激素類化合物的檢測也將起到重要作用。因此化學發(fā)光免疫分析技術(shù)的發(fā)展拓寬了免疫分析的應(yīng)用領(lǐng)域,具有廣闊的市場前景和非常可觀的經(jīng)濟效益。4 合作方式技術(shù)轉(zhuǎn)讓或合作開發(fā), 商談。5 所屬行業(yè)領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生。
清華大學
2021-04-13