本研究構(gòu)建一種谷氨酸棒桿菌基因工程菌,使其同時(shí)發(fā)酵生產(chǎn)兩種產(chǎn)品:聚羥基脂肪酸酯和異亮氨酸;前者是胞內(nèi)產(chǎn)品,后者是胞外產(chǎn)品。該基因工程菌可以降低生產(chǎn)成本,具有工業(yè)應(yīng)用前景。研究結(jié)果顯示:將 phaCAB 基因簇導(dǎo)入 WM001后,WM001/pDXW-8-phaCAB 96h 產(chǎn)量為 9.58 g/L,而 WM001/pDXW-8 96h 產(chǎn)量為6.65 g/L,產(chǎn)率提高 65%達(dá)到 0.15g 異亮氨酸/g 葡萄糖。PHA 產(chǎn)量達(dá)到 28.7%(w/w)。
關(guān)鍵技術(shù)
聚羥基脂肪酸酯(PHAs)是部分微生物生存在具有較高碳源與氮源的條件下,生成的一類微生物自身碳源、能源儲(chǔ)備物的胞內(nèi)聚酯。根據(jù)相關(guān)報(bào)道,將 PHB 合成代謝基因簇導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi),可實(shí)現(xiàn) PHB 與某些代謝產(chǎn)物的聯(lián)產(chǎn)和增產(chǎn),提高底物的利用率。L-異亮氨酸是一種人體必需氨基酸,因其在醫(yī)藥、食品和健康保健領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用,而使其近幾年的生產(chǎn)能力發(fā)展迅速,目前國際上比較先進(jìn)的主流生產(chǎn)方式為發(fā)酵法生產(chǎn) L-異亮氨酸。谷氨酸棒桿菌(Corynebacteriumglutamicum)是一種小棒狀、革蘭氏陽性的食品安全生產(chǎn)菌,目前已經(jīng)用于工業(yè)生產(chǎn) L-異亮氨酸,本成果構(gòu)建能高產(chǎn) PHAs 的 C. glutamicum 菌株,具有工業(yè)化應(yīng)用潛力。
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