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基于可切割自聚集標簽的多肽表達純化方法

2021-04-13 00:00:00
云上高博會 http://www.g2h0uzv.xyz
關鍵詞: 多肽藥物
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所屬領域:
化學化工
項目成果/簡介:

01. 成果簡介

本項成果提供了一種多肽的合成方法,利用了自聚集短肽誘導目標多肽的聚集,使得生物合成的多肽以沉淀形式保護下來,從而避免降解;然后通過體外切割,獲得目標多肽,優化了多肽合成和分離的工藝,操作簡便且不受多肽的長度限制,有望為多肽藥物的高效制備提供一種解決方案。

具體的,在目標多肽的N端或C端融合一段自聚集短肽,這兩者之間采用一個連接肽將兩者融合。這個連接肽可以是化學切割、酶切割的識別序列或自切割肽(內含肽)。通過分子克隆,將這三段肽(目標肽、連接肽、自聚集短肽)克隆并轉化至表達菌株(如大腸桿菌BL21(DE3))中進行表達。隨后通過離心或過濾收獲菌體,利用高壓、超聲波等技術進行細胞破碎;再通過離心或過濾收集不可溶部分(聚集體);在簡單洗滌后,根據所選的連接肽的屬性進行切割,如化學切割,蛋白酶切割或誘導自切割;再通過離心或過濾去除不可溶部分,收集上清即可得到粗純多肽產品。如下圖所示:

image.png

02. 應用前景

基于本項技術可以合成糖尿病仿制藥利拉魯肽、矮小癥仿制藥生長激素(hGH)等。

03. 知識產權

相關成果已授權3項中國發明專利及1項美國專利。

04. 團隊介紹

團隊主要研究領域為合成生物學和生物制藥(包括他汀類化學藥物和多肽藥物),負責人林章凜博士為教授、博士生導師,教育部長江學者,廣東省“珠江人才計劃”科技領軍人才。先后承擔973、863、國家重點研發計劃專項、國家自然科學基金等科研項目,發表SCI論文50余篇,申請專利20余項。

05. 合作方式

商務合作。

06. 聯系方式

[email protected]

[email protected]



項目階段:
產業化應用
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