本發明涉及生物技術領域,旨在提供一種EV71病毒單克隆抗體、雜交瘤細胞株及應用。該雜交瘤細胞株,保藏于中國典型培養物保藏中心,保藏名稱為雜交瘤細胞A7-E3,保藏號為CCTCC?No.C201123。本發明給EV71病毒抗原檢測以及捕獲法進行抗EV71病毒IgG、IgM的檢測提供一種高特異性、高靈敏度的優質的抗體。