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開發了一種還原敏感的多功能載體材料，載體的疏水性嵌段包載抗腫瘤光動力藥物Ce6，攜帶NTA基團的嵌段則通過NTA和Cas9蛋白末端His標簽之間的特異性結合高效負載Cas9蛋白/sgRNA復合物，然后通過靜電組裝在外層引入靶向腫瘤組織的iRGD分子。這樣的載體結構設計和藥物聯合輸送為實現腫瘤組織特異性的基因編輯和聯合治療提供了可行性。納米藥物靶向輸送至腫瘤細胞后，在近紅外光的輻照下，Ce6產生的活性氧使溶酶體破裂，使納米藥物從溶酶體中逃逸出來，NTA和載體聚合物之間的二硫鍵可響應胞質內的谷胱甘肽等還原劑而斷裂，從而將Cas9蛋白/sgRNA復合物從載體上釋放出來，執行基因編輯功能。在正常的組織中，由于沒有近紅外光的輻照，Cas9蛋白/sgRNA復合物難以從溶酶體中逃逸，無法執行基因編輯的功能。通過紅外光輻照和還原敏感設計實現了腫瘤組織特異的基因編輯。此外，腫瘤細胞在受到Ce6所生成活性氧攻擊時，會上調Nrf2（一種活性氧代謝的關鍵蛋白）的表達，提高腫瘤細胞對活性氧的耐受性。使用靶向Nrf2基因的sgRNA，可以通過聯合輸送的Cas9蛋白/sgRNA復合物使Nrf2基因失活，提高腫瘤細胞對活性氧的敏感性。總而言之，通過多功能載體聯合輸送Ce6和Cas9蛋白/sgRNA復合物，一方面實現了腫瘤特異性的基因編輯，另一方面也實現了基因編輯和光動力治療的聯合治療，協同提高了基因編輯的特異性和治療效果，為基因編輯技術的發展提供了一個新的方向。

在基因治療中，載體將治療基因導入靶細胞，使其與宿主染色體整合為一體或在宿主細胞中表達特定蛋白質，從而治療因基因異常或缺陷而導致的疾病。因此，基因治療成敗的關鍵在于基因遞送系統。基因治療市場未來市場空間巨大。據Clinical Trial數據，目前基因藥物以病毒載體為主，約占所有載體的70%，未來病毒載體市場前景十分廣闊。2017年FDA批準羅氏公司的基于AAV病毒載體的基因療法Luxturna用來治療患有特定遺傳性眼疾的兒童和成人患者。從實驗室簡單的基因過表達、體外的基因干擾、基因編輯（CRISPR/Cas9）技術 、CAR-T免疫療法技術、到腫瘤、神經、代謝、眼科、心臟、肝臟、肺等臨床前動物和臨床人體試驗的研究，基因病毒載體的應用無處不在。我國離世界先進水平在技術上存在巨大差距，基因運載工具由于開發難度大，生產工藝要求高，目前我國和國際先進技術相比還存在非常大的差距，國內基因治療藥物的研發還處于起步階段，還存在巨大的市場需求沒有得到滿足，而目前美國FDA已有批準的的基因治療藥物收費非常高昂。    目前采用病毒載體的基因療法已經成功用于血友病，先天性黑矇，脊髓肌肉萎縮癥等單基因疾病的治療。

產品詳細介紹  由于qPCR是實時定量檢測致病病原體基因核酸，因此它比化學發光、實時分辨、蛋白芯片等免疫學方法更具獨到優勢。   基因擴增儀實時熒光定量pcr儀|熒光定量pcr儀價格|abi熒光定量pcr儀|熒光定量pcr|熒光定量pcr原理|實時熒光定量pcr|熒光定量pcr技術|熒光定量pcr結果分析|實時熒光定量pcr技術|熒光定量pcr步驟|基因擴增儀-實時熒光定量pcr儀價格原理科研型TC988C（48孔） 產品編號：TC988C   產品規格：48孔X0.2 產品簡介：由于qPCR是實時定量檢測致病病原體基因核酸，因此它比化學發光、實時分辨、蛋白芯片等免疫學方法更具獨到優勢。 產品詳情：僅供科研使用 國際領先水平的TC988型實時熒光定量PCR儀適用于臨床及科研以聚合酶鏈式反應為特征的、以實時熒光定量檢測分析DNA/RNA為目的的病原體檢測及基因分析。 動物疾病檢測：禽流感、新城疫、口蹄疫、豬瘟、沙門菌、大腸埃希菌、胸膜肺炎放線桿菌、寄生蟲病等、炭疽芽孢桿菌。 食品安全：食源微生物、食品過敏源、轉基因、乳品企業阪崎腸桿菌等檢測。 科學研究：醫學、農牧、生物相關分子生物學定量研究。 應用行業：大學及研究所 技術原理： 標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后，完成高溫變性，低溫復性，適溫延伸的熱循環，并遵守聚合酶鏈反應規律，與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷，熒光素游離于反應體系中，在特定光激發下發出熒光，隨著循環次數的增加，被擴增的目的基因片段呈指數規律增長，通過實時檢測與之對應的隨擴增而變化熒光信號強度，求得CT值，同時利用數個已知模板濃度的標準品作對照，即可得出待測標本目的基因的拷貝數。 技術參數： 標本載體 0.2ml薄壁PCR離心管 標本數量 標本數量48個，包括4個標準品 試    劑 SYBR Green I，FAM，Tex Red，FITC等熒光染料，開放式PCR試劑 反應體系 10-100μL 建議質控 四個陽性標準品、陰性對照   指標 熒光激發波長 470nm 熒光發射波長 530nm，640nm，710nm 570nm，605nm 熒光檢測方式 光開關陣列組合光電倍增管PMT方式? 控溫范圍 4.0℃-99.0℃? 熱蓋溫度 100℃～120℃? 升/降溫速度 ≥4.0℃/S（Max）? 溫度均勻性 ≤±0.3℃? 溫度精確度 ≤±0.3℃? 溫度顯示精度 0.1℃? 檢測范圍 101～1010DNA/RNA copy/ml CT值重復性誤差 CV≤2.1％?重要 核酸精度相關系數 R≥0.997?重要   軟件 溫階 1～9 循環 1～99 保溫時間 1～9999秒     +.3.0.0.0..366999文件 1～9個連接 升級方式 遠程硬件內控軟件升級   系統接口 RS-232C串行接口，雙向數據 主機操作系統 Windows2000/XP 產品外形尺寸 50cm× 40cm × 35cm 產品重量 25kg 使用環境 溫度5～40℃，相對濕度≤80％ 使用電源 AC220 × （1±10%）V,50 × （1±2%）HZ 功耗 1100VA   多規格 提供96孔，多通道/多色、36孔等不同規格產品 產品特點： 專利技術應用實現快速高效均衡擴增檢測由光開關陣列、自聚焦透鏡和尾纖準直器及變增益微光O/E裝置組成的MEMS有機整體，在以16位單片機為核心的電控裝置管理下，能在毫秒級時間內完成多個標本快速均衡掃描檢測，避免了機械掃描方式或CCD掃描方式引起的時間滯后或漸暈誤差。實現標準樣本的PCR熱循環擴增及高通量實時熒光激發和定量檢測。  1.走在PCR技術的前列 在PCR儀研發和市場化領域中歷史悠久； 將標準化的PCR檢測技術成功廣泛用于臨床；  2.快速實時PCR技術實現了DNA/mRNA檢測的快速性 實時檢測啟用熒光探針標記特定核酸的93 方法使準確性更高； 簡化了傳統PCR方法； 使用最少的樣本量，在一小時左右出結果； 3.簡便閉管分析使您完成加樣后就無須再接觸樣本 減少樣本消耗殆盡風險； 縮短了出報告時間； 簡化了試驗步驟； 4.提高了用戶高級應用的靈活性 提供了用戶自定義PCR操作平臺； 建立您的用戶自定義應用； 分析用戶自定義試驗； 相關鏈接：http://www.tocan.cn/index.php?do=product&CategoryID=1004   詳情請鏈接網址：www.tocan.cn聯系電話：021-51863860、18917331948   聯系QQ：278622785                          傳　　真：021-55236681 公司地址：上海市翔殷路165號A區319室 郵編：200433

本發明涉及豬ApoE基因敲除載體及其構建方法與應用，本發明的載體命名為pApoEKO-DTA-M，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO : 1所示，其構建方法包括如下步驟：(1)擴增豬ApoE基因側翼序列作為基因打靶的長臂和短臂；(2)短臂與打靶載體ploxp分別酶切、連接后，再與長臂連接；去除tk，與dta基因片段連接；(3)在長短臂之間插入特異性啟動子Cre，構建得到ApoE基因敲除載體。本發明的豬ApoE基因敲除載體可用于培育敲除了ApoE基因的豬，用于動脈硬化模型動物的制備。

本發明公開了一種抗蟲融合基因,該基因包括從5’-3’依次含有編碼BT晶體毒素Cry1的核苷酸序列和編碼Cry9Aa毒素的核苷酸序列;且上述2個核苷酸序列位于同一個開放閱讀框內。該抗蟲融合基因包括Cry1Aa、Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1Aa的修飾基因、Cry1Ab的修飾基因或Cry1Ac的修飾基因;還包括Cry9Aa或者Cry9Aa經過修飾的基因。本發明還同時公開了上述抗蟲融合基因所編碼的融合蛋白,該融合蛋白從N端至C端依次為Cry1晶體毒素和Cry9Aa毒素。本發明的融合蛋白能用于制備轉基因抗蟲農作物。

本發明涉及幾丁質合酶，特別涉及卵菌門中的幾丁質合酶，其氨基酸序列為與如SEQ ID No.4所示的氨基酸序列在相似性在75％以上，優選在80％以上，更優選在90％以上，最優選在95％以上且具有與如SEQ ID No.4所示的氨基酸序列相同功能的氨基酸序列。所述幾丁質合酶的活性水平能夠調節卵菌的活性孢子囊和活性游動孢子的產量從而影響卵菌的致病力或寄主的發病程度。

（給予一名突變患者的卵子體外注射一定劑量的野生型TRIP13 cRNA，可使卵子成功排出第一極體）復旦大學生物醫學研究院教授王磊和副研究員桑慶團隊聯合國內多家生殖中心，研究發現了導致人類卵子MI期阻滯的第二個突變基因TRIP13（

本發明公開了植物耐熱相關蛋白TaXPD及其編碼基因與應用。本發明所提供的蛋白質為如下a1)或a2)或a3)：a1)氨基酸序列是序列表中序列2所示的蛋白質；a2)在序列表中序列2所示的蛋白質的N端或/和C端連接標簽得到的融合蛋白質；a3)將a1)或a2)所示的蛋白質經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加得到的與植物耐熱性相關的蛋白質。實驗證

缺乏安全、高效率的基因導入載體是當前基因治療面臨的關鍵科學問題和技術難題。我們在前期研究中，針對目前常用的聚乙烯亞胺（PEI25K）非病毒基因載體面臨的不可降解、毒性大、難代謝、靶向性差等問題，采用肝素與小分子量聚乙烯亞胺（PEI）為主要原料，設計、制備了一種新型的肝素/PEI腫瘤靶向基因治療載體，具有可降解、毒性低、可靶向腫瘤、可靜脈注射等特點，顯示了較好的臨床應用前景。本項目將在前期研究的基礎上，進一步優化肝素/PEI的制備工藝，闡明影響肝素/PEI生物學效應的關鍵因素，研究其體內分布、代謝和早期安全性，研發一種具有臨床應用前景的新型肝素/PEI靶向腫瘤基因治療載體，為創制新型腫瘤基因治療藥物提供新的基因導入系統選擇。 針對當前常用PEI25K（聚乙烯亞胺）非病毒基因載體不可降解、毒性高和靶向性差的缺點，首先采用肝素偶聯小分子量PEI制備了一種新型可降解、毒性低、轉染效率高的陽離子肝素-PEI基因載體，進一步利用肝素具有腫瘤靶向性、帶負電荷、可在腫瘤部位快速降解、生物相容性好等特點，通過在DNA/肝素復合物表面修飾肝素，制備了一種腫瘤靶向的新型肝素/PEI基因載體。下一步將研究肝素/PEI的粒度分布、行貌、表面電位、穩定性、基因裝載能力、降解行為、基因釋放行為等理化性質，闡明制備工藝對這些重要理化性質的影響規律。研究肝素/PEI的細胞毒性、轉染效率、腫瘤靶向性、體內分布等生物學效應，闡明肝素/PEI的理化性質對這些體內外生物學效應的影響規律。基于我們已有的非病毒基因載體中試生產平臺，設計肝素/PEI中試生產流程，開展中試制備工藝研究。