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高性能角蛋白酶的高效表達與應用研究
角蛋白酶是一種特異性蛋白酶類，可降解結構復雜、硬質難溶的角蛋白，具有多種優(yōu)良的催化特性，在生物加工、綠色制藥、廢棄生物質處理、生物制革、生態(tài)紡織、洗滌劑等實際應用中備受關注，被認為是有著巨大應用潛力和市場前景的新一代蛋白酶類。
本項目從角蛋白酶基因挖掘、高效表達、性能改造及其應用研究等方面開展了一系列工作。課題組目前建立了角蛋白酶資源庫，是我國擁有角蛋白酶基因資源產(chǎn)權最多和最具多樣性來源的單位；實現(xiàn)了角蛋白酶基因在大腸桿菌及枯草芽孢桿菌等外源宿主中的克隆及高效表達；在 5L 罐上發(fā)酵酶活最高可達10000 U/mL 以上，是目前文獻報道的重組角蛋白酶表達最高水平；項目已完成了 1M3 規(guī)模中試試驗，成本降低 30%以上。在應用方面，本項目成功將角蛋白酶用于生物法制備納米銀粒子 AgNPs，與傳統(tǒng)化學法相比，酶法合成的納米銀具有更好的抑菌活性。另外，項目組已首次開發(fā)出無膠原活力的高特異性角蛋白酶，具有高角蛋白活力，不會對皮革膠原造成破壞，能保護膠原結構完整性，可開發(fā)出不傷及皮膚真皮的洗滌劑產(chǎn)品、藥品及化妝品，在生物制革領域也具有極大應用價值，可緩解制革工業(yè)中的爛皮現(xiàn)象；同時本研究所開發(fā)的角蛋白酶在活性多肽制備中也表現(xiàn)出良好的應用前景。
江南大學
2021-04-13
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一種酪蛋白凝膠顆粒乳化劑及其制備方法和用途
本發(fā)明公開了一種酪蛋白凝膠顆粒乳化劑及其制備方法和用途。本發(fā)明中的酪蛋白凝膠顆粒乳化劑是通過向含有酪蛋白或酪蛋白酸鹽的溶液中添加京尼平進行交聯(lián)制得的，交聯(lián)條件為在體系pH值為6～10.5、溫度為10～50℃的條件下交聯(lián)10～60h。所得交聯(lián)的蛋白凝膠顆粒表面含有大量的毛刷層結構，能夠迅速地吸附到油水界面，可增加油水界面的機械強度，具有更高的乳化效果和乳化穩(wěn)定性，同時交聯(lián)的酪蛋白凝膠顆?？稍谟退缑嫱暾卮嬖冢粫l(fā)生解離，具有較高的界面活性，空間位阻較大，能有效地防止液滴之間的聚集和聚并，可長期穩(wěn)定水包油型乳狀液類食品。
中國農(nóng)業(yè)大學
2021-04-11
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生長因子類蛋白植物油體生物反應器研制
隨著新功能基因的分離,克隆以及各種農(nóng)作物高效表達技術平臺的逐步建立,植物反應器的研究越來越深入.本實驗利用擬南芥(Arabidopsis thaliana)油體系統(tǒng)表達植物油體蛋白-角質細胞生長因子-2(Keratinocyte growth factor-2,KGF-2).首先人工合成植物密碼子偏好性的KGF-2基因,并通過PCR技術克隆了擬南芥油體蛋白Oleosin基因,構建由種子特異性啟動子驅動的,含有油體蛋白和KGF-2融合基因的植物油體特異表達載體;通過農(nóng)桿菌介導法轉化野生型擬南芥,采用Basta篩選之后,獲得26株轉基因擬南芥.
吉林農(nóng)業(yè)大學
2021-05-04
脲酶陰性,無豆腥味,可直接食用的大豆分離蛋白生產(chǎn)方法
本發(fā)明在大豆分離蛋白生產(chǎn)過程,增加了在加堿溶出蛋白浸出液后,蛋白濃度<3%的條件下,通過滅酶裝置,高溫(130°-145℃),瞬時(2-15秒),增加高溫滅酶工藝環(huán)節(jié)后,所產(chǎn)大豆分離蛋白脲酶反應陰性,無豆腥味,可直接食用,對人體無害.本發(fā)明所產(chǎn)的新型分離蛋白,用于面制品或肉制品添加,均可保證取得產(chǎn)品無豆腥味的良好效果.
長春大學
2021-04-30
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特異抑制沙眼衣原體的優(yōu)化重組噬菌體蛋白的制備與應用
相關專利制備出一種對衣原體的生長具有明顯的特異抑制作用。該蛋白對沙眼衣原體有確切的特異的清除效果
天津醫(yī)科大學
2021-02-01
一批潛在新冠病毒棘突蛋白抑制劑的研究
南方科技大學生物系副教授王冠宇研究團隊、醫(yī)學院教授張健研究團隊聯(lián)合深圳大學總醫(yī)院李海鷹研究團隊初步篩選出一批新型冠狀病毒棘突蛋白(spike glycoprotein)潛在抑制劑，相關成果發(fā)布在預印版平臺Research Square。 研究表明，新冠病毒利用其包膜上的棘突蛋白識別人類細胞膜受體蛋白ACE2，從而侵染人類細胞，引發(fā)嚴重的呼吸道感染癥狀。阻止病毒棘突蛋白與人類受體蛋白ACE2相互作用是研發(fā)有關藥物、抗體和疫苗的重要方向。 新冠病毒棘突蛋白抑制劑篩選策略 聯(lián)合研究團隊為加快有關抑制劑的發(fā)現(xiàn)，采用“老藥新用(Drug repurposing)”的策略，以公開的RBD-ACE2復合物晶體結構為靶點，通過同源建模(Homology Modeling)、計算機輔助藥物設計(Computer-aided drug design, CADD)和虛擬篩選(Virtual screening)等計算生物學方法，篩選了近15000個小分子化合物。這些化合物包含Drugbank化合物庫中所有的FDA批準藥物，以及TCMSP化合物庫中的天然活性產(chǎn)物。研究團隊將這些化合物與病毒棘突蛋白受體結合結構域進行分子對接，發(fā)現(xiàn)一批結合非常緊密的化合物，如Digitoxin,Nilotinib,Lemborexant，Raltegravir,Bisindigotin和 Evodiamine等。 Digitoxin與棘突蛋白結合模式圖 Bisindigotin與棘突蛋白結合模式圖
南方科技大學
2021-04-10
特異抑制沙眼衣原體的優(yōu)化重組噬菌體蛋白的制備與應用
相關專利制備出一種對衣原體的生長具有明顯的特異抑制作用。該蛋白對沙眼衣原體有確切的特異的清除效果應用范圍:沙眼衣原體引起的泌尿生殖道感染的發(fā)病率居性傳播疾病之首，是美國最常見的疾病之一，在全部人群中感染占 10-19%，是引起前列腺炎和盆腔炎最主要的致病菌，可導致不孕和異位妊娠。目前臨床上沙眼衣原體的治療以抗生素為主，不僅治療效果不令人滿意，而且引起菌群失調(diào)，抵抗力下降等眾多的問題。 經(jīng)過進一步的人體實驗，這種衣原體噬菌體蛋白可以轉化為臨床最為需求的、國際上首創(chuàng)的最新生物治療，特異性應用于臨床沙眼衣原體感染的治療。效益分析:基于相關專利開發(fā)應用在沙眼衣原體生殖道感染的生物治療。 一、主要技術優(yōu)勢：分子量約 50kDa 的蛋白片段，免疫原性低，更容易進入組織深層，制造成本低； 二、抑制率可達 65%-92%，對各型衣原體標準株和臨床病人中分離株。 三、這種良好的效果在生殖道衣原體感染小鼠模型中得到了驗證
天津醫(yī)科大學
2021-04-10
復合物理場協(xié)同強化菜籽蛋白糖基化改性的方法
其他成果/n一種復合物理場協(xié)同強化菜籽蛋白糖基化改性的方法，包括如下步驟：1)菜籽蛋白的制備；2)菜籽蛋白溶液的配制；3)蛋白質?糖混合溶液的配制；4)微波?超聲波復合物理場協(xié)同處理；5)離心分離；6)透析與干燥。其中，步驟3)中，微波的功率為200～500W，超聲波的功率為100～300W，反應體系的溫度為60～70℃，反應時間為6～10min。本發(fā)明利用微波快速加熱效應和超聲波的機械攪拌與加速擴散作用，可避免反應體系出現(xiàn)局部高溫現(xiàn)象，使糖基化反應更為均勻；同時微波的電磁場與超聲波的空穴作用會在反應體系中形成超臨界高溫與高壓的微環(huán)境及界面濃縮現(xiàn)象，從而避免傳統(tǒng)濕熱法下由于長時間持續(xù)高溫作用而產(chǎn)生褐變物質，消除了色澤對產(chǎn)品的影響。
武漢輕工大學
2021-04-11
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復合蛋白酶解提取鴨硫酸軟骨素技術
本技術首先根據(jù)鴨胸軟骨的化學組成設計了一種用于提取鴨硫 酸軟骨素的新型復合蛋白酶的基礎配方，并利用復配酶制備鴨硫酸軟骨素，其 工藝包括鴨胸軟骨骨粉的制備、鴨胸軟骨骨粉的酶解提取、蛋白質的沉降、硫 酸軟骨素粉末四個步驟。本發(fā)明采用了復配酶解法提取鴨胸軟骨的硫酸軟骨素， 采用新型復合蛋白酶和胰蛋白酶復配，去掉了堿提這一步，在復配酶使用上也 進行了優(yōu)化，其收率比其它方法提高了 20%左右，產(chǎn)品純度達到 90%~95%。用復 合酶代替稀堿或濃堿解離軟骨能夠大大降低對環(huán)境的污染，并且可以有效縮短 生產(chǎn)周期、降低生產(chǎn)成本、增加了產(chǎn)品收率、提高產(chǎn)品質量，填補了該領域的 空白。 技術優(yōu)點或者效益預測:硫酸軟骨素(Chondroitinsulfate，CS)是 D-葡萄糖 醛酸和 N-乙酰氨基半乳糖以β-1,4-糖苷鍵連接而成的重復二糖單位組成的酸 性黏多糖。硫酸軟骨素具有抗凝血、抗炎癥、抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、降血 脂、防止動脈粥樣硬化、調(diào)節(jié)體內(nèi)水分、清除自由基和延緩衰老等多種生理功 能，可應用于食品、藥品、各種保健品及高檔化妝品中。我國是全球硫酸軟骨 素產(chǎn)量最大的國家，占全球產(chǎn)量的 80%以上，年平均產(chǎn)量多于 4000 噸；我國硫 酸軟骨素主要出口到美國、歐洲、日本等地，其中美國作為我國硫酸軟骨素第 一大出口市場，出口份額約占 50%。所以，隨著硫酸軟骨素生物活性功能不斷研 究及其應用領域的不斷擴展，硫酸軟骨素用途越來越廣，具有廣闊市場應用前 景。
青島農(nóng)業(yè)大學
2021-04-11
一種具有ACE抑制功能的魚肉蛋白肽及其制備方法
本發(fā)明提供了一種具有ACE抑制功能的魚肉蛋白肽及其制備方法，屬于食品加工技術領域。本發(fā)明的魚肉蛋白肽制備方法包括：(1)制備去脂的魚肉漿液；(2)調(diào)節(jié)魚肉漿液溫度和pH值1?3，加入胃蛋白酶酶解；(3)調(diào)節(jié)溫度和pH值為6.5?8.0，加復合蛋白酶酶解；(4)酶解液高溫下保溫后冷至室溫，離心并取上清液通過二步超濾法處理；(5)濾液過柱分離，收集洗脫峰，即得。本發(fā)明方法適于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，不添加任何添加劑，制得的魚肉蛋白肽具有優(yōu)異的ACE抑制功能，IC50小于0.34mg/mL，肽中分子量小于1000D的肽比例為95％以上，易吸收，可廣泛應用于特需食品和營養(yǎng)食品的制造。
中國農(nóng)業(yè)大學
2021-04-11