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畢赤酵母(Pichia pastoris)是應用最為廣泛的外源蛋白表達宿主 菌，它是甲醇營養型酵母中的一種，能夠在以甲醇為唯一碳源的培養 基中生長(熊向華，2006)。畢赤酵母是迄今最為成熟的外源蛋白表達 系統之一，目前己有上百種外源蛋白基因在畢赤酵母中獲得表達。外 源基因在畢赤酵母中的表達需要有幾個基本條件：一是需要有高效的 啟動子和終止子；二是要有同源序列以便外源基因能夠有效地整合到 畢赤酵 母基因組中；三是要有

項目簡介： 本項目以納米 TiN 等陶瓷顆粒為填料， 用聚四氫映喃配二醇

聚甲氧基二甲醚 (聚甲氧基甲縮醛) 作為新型清潔油品添加劑研發的主要目的是解決二甲醚作車用柴油稠和組分存在的缺陷。我國煤炭資源豐富，由煤基甲醇合成柴油調合組分具有戰略意義和良好的經濟價值。 二甲醚從燃燒特性看，是一種理想的清潔燃料，但從其物理性能看，作為車用燃料也有其明顯的缺陷，主要是其沸點很低，必須和現有的汽油、柴油銷售系統一樣形成一個完整的體系，常溫下蒸氣壓高，爆炸范圍寬，安全要求明顯高于汽油、柴油，使用二甲醚的車輛必須要進行發動機的改造，造成了二甲醚作車用替代燃料的社會運行成本明顯升高。由甲醇、二甲醚在低于100℃條件下利用酸性催化劑經催化精餾反應生產聚甲氧基二甲醚的技術，具有十分顯著的經濟價值。在柴油中摻入20％ (體積) 的聚甲氧基二甲醚，可提高柴油的潤滑性，減少燃燒煙霧生成，同時保持較高的十六烷值和燃燒性能，避免了二甲醚的缺陷。目前國內油品都經過脫硫工藝，聚甲氧基二甲醚加入到油品中可提高油品的潤滑性。

 傳統的植物組織培養的方法是以瓊脂為支持物的半固體或固體培養。固體、半固體培養是一個勞動密集型技術，需要大量的手工勞動，導致生產成本居高不下。液體培養易于操控，適合大規模的組培生產，但是由于組培苗長期的浸泡在液體中，無法進行有效的氣體交換，組培苗玻璃化情況嚴重、抗逆性較差，栽培死亡率高，也增加了生產成本。隨著植物組織培養產業日益興盛，傳統的固體、半固體培養及液體培養模式已經滿足不了產業的需求。新型生物反應器采用間歇浸沒培養模式和自動化控制技術，并以半夏等藥用植物為材料進行試驗，優化該裝置的浸沒頻率等參數，實現了高通量植物種苗的工廠化擴繁。與傳統的培養模式作比較，無論在培養周期、種苗質量上均較優。由于通量大，在育種上的應用節省了時間和人力、物力，效率大大提高，達到產業化應用水平。項目技術優勢間歇浸沒培養系統結合了固體培養（最大化氣體交換）和液體培養（營養充分的吸收）的優點，在很多種植物幼苗和體細胞胚體的培養中占有一定的優勢，植物的長勢情況和增殖率比傳統的固體培養、半固體培養和液體培養都要好，所獲得的幼苗和體細胞胚體質量高，更能很好的適應環境，移栽成活率較高。間歇浸沒培養模式采用程序控制，自動化程度高，大大的減少了勞動力的消耗，生產成本和傳統的模式相比大幅度的降低，在商業化生產上占有很大的優勢。①.減少甚至避免玻璃化 實驗證明，增加通風和植物材料間歇的接觸液體培養基是降低玻璃化的有效方法，而間歇浸沒培養系統正好具備這兩個特征。②.組培苗環境適應性強 利用傳統的培養方式獲得的組培苗，對環境適應能力較弱，在煉苗階段由于環境變化較大，一般成活率較低。但間歇浸沒系統獲得的植物由于在培養時就進行了外界空氣的鍛煉，因此，絕大多數能夠成功的適應環境，煉苗成活率較高。

傳統的植物組織培養的方法是以瓊脂為支持物的半固體或固體培養。固體、半固體培養是一個勞動密集型技術，需要大量的手工勞動，導致生產成本居高不下。液體培養易于操控，適合大規模的組培生產，但是由于組培苗長期的浸泡在液體中，無法進行有效的氣體交換，組培苗玻璃化情況嚴重、抗逆性較差，栽培死亡率高，也增加了生產成本。隨著植物組織培養產業日益興盛，傳統的固體、半固體培養及液體培養模式已經滿足不了產業的需求。 新型生物反應器采用間歇浸沒培養模式和自動化控制技術，并以半夏等藥用植物為材料進行試驗，優化該裝置的浸沒頻率等參數，實現了高通量植物種苗的工廠化擴繁。與傳統的培養模式作比較，無論在培養周期、種苗質量上均較優。由于通量大，在育種上的應用節省了時間和人力、物力，效率大大提高，達到產業化應用水平。 項目技術優勢 間歇浸沒培養系統結合了固體培養（最大化氣體交換）和液體培養（營養充分的吸收）的優點，在很多種植物幼苗和體細胞胚體的培養中占有一定的優勢，植物的長勢情況和增殖率比傳統的固體培養、半固體培養和液體培養都要好，所獲得的幼苗和體細胞胚體質量高，更能很好的適應環境，移栽成活率較高。間歇浸沒培養模式采用程序控制，自動化程度高，大大的減少了勞動力的消耗，生產成本和傳統的模式相比大幅度的降低，在商業化生產上占有很大的優勢。 ①.減少甚至避免玻璃化實驗證明，增加通風和植物材料間歇的接觸液體培養基是降低玻璃化的有效方法，而間歇浸沒培養系統正好具備這兩個特征。 ②.組培苗環境適應性強利用傳統的培養方式獲得的組培苗，對環境適應能力較弱，在煉苗階段由于環境變化較大，一般成活率較低。但間歇浸沒系統獲得的植物由于在培養時就進行了外界空氣的鍛煉，因此，絕大多數能夠成功的適應環境，煉苗成活率較高。 技術成果 本項目已利用新型生物反應器進行了半夏、鐵皮石斛、大蒜、百合等經濟植物的擴繁。 目前本項目已申請發明專利1項，實用新型專利2項：

涂料領域，環氧樹脂涂料向高固含量、無溶劑化和水溶性化方向發展。目前，國外 純環氧涂料生產呈現下降趨勢，僅占 2.6％，而環氧／聚酯粉末涂料已上升到 50％左右。 此外，大量使用的還有環氧／丙烯酸粉末涂料。從總的發展趨勢看，今后環氧涂料發展 方向是超薄膜化及 100℃以下低溫固化和高溫快速固化等新型品種。 環氧樹脂水性化是指將環氧樹脂以微粒、液滴或膠體形式分散在水中而配得穩定的 分散體系。不含揮發性有機溶劑或含量很低，不燃，儲存、運輸和使用過程中的安全性 很高，而且固化后形成的涂膜很容易去除放射性污染，而且水性環氧良好的復涂性可以 方便核電站的多次裝修。 國外自 20 世紀 50 年代就開始了環氧樹脂的水性化研究，其中將環氧樹脂制成乳液 是最常用的研究途徑。水性環氧樹脂配合固化劑最為廣泛的用途是用作涂料。與傳統環 氧涂料相比，由于使用水取代了有機溶劑作為稀釋劑，不僅在涂料的生產和施工中不會 發生由于有機溶劑的揮發造成的中毒和燃燒爆炸等情況，而且可以大幅度降低涂料的成 本。在施工方面，水性環氧涂料具有較好的重涂性，能夠在較長的時間內仍保持較好的 附著力，這是溶劑型環氧樹脂不能比擬的；在施工后期，涂覆水性環氧樹脂的清洗工作 比較簡單，使用過的容器和刷子只要用水和肥皂就可以清洗干凈，與溶劑型環氧樹脂相 比既經濟又方便環保。本產品使用水性環氧樹脂，通過選擇不同的固化劑，改變環氧/ 胺的比率不，可以制備出不同光澤、固化速度和使用期、具有較好附著力、耐溶劑性、 耐酸堿性的水性環氧涂料。 一、環氧類地坪系統 1、彩砂地坪涂裝系統 耐磨損、耐強力沖擊、裝飾效果好，具備一定防滑功能的地坪，特別適用于機場、 地鐵、食堂、休息室、辦公室、食品生產車間及醫院、學校的實驗室等重視外觀清潔， 耐久性好的地方。 2、防腐墻面漆涂裝系統 適用范圍：嚴格要求防霉、防腐的食品廠、飲料廠、酒廠、血液中心、醫院、制藥、 生化廠的墻壁、天花的涂裝。 3、防靜電自流平型涂裝系統 要求高度清潔、美觀、無塵、無菌及防靜電的電子、微電子、通訊產品、電腦生產 行業，大型精密儀器廠房等。 4、防滑地坪涂裝系統 特別適用于有水、油等地面，以及一切需要防滑的地面。 5、自流平地坪涂裝系統 要求高度清潔、無塵、無菌的電子、微電子行業，實行 GMP 標準的行業，血液制品 行業，要求耐磨、抗重壓、抗沖擊力、防化學藥品腐蝕的其他行業，也可用于學校、辦 公室、家庭等地坪。 6、水性環氧地坪涂料 適用于食品廠、電子廠、制藥廠、化妝品廠、造紙廠、物流倉庫、地下室等要求潔 凈的地面、墻面或天花板的涂裝，也可用于學校、廣場、走廊、商場和車道等硬度、耐 磨性要求高的場合。 對眾多底材具有極高的附著力，固化的涂膜耐腐蝕性和耐化學藥品性能優異，涂膜 收縮小、硬度高、耐磨性好、電氣絕緣性能優異；不含有機溶劑，節約能源，無污染， 符合環保要求。 二、水性環氧防腐涂料系列 1. 水性環氧富鋅防腐底漆 用于船舶、集裝箱、海上平臺、碼頭等海洋設施，石油化工廠管道及貯罐、冶金、 電力、食品、紡織等行業中鋼鐵構件的防銹和防腐。 重防腐領域的環保水性涂料，是目前市場上溶劑型涂料的最佳替代產品。 2. 水性環氧云鐵防腐涂料 可作為環氧富鋅底漆等高性能防銹漆的中間漆層，以增強整個涂層的保護性能，可 以作為鋼鐵上金屬噴鋅層或鍍鋅鋼鐵表面的封閉涂層。 在富鋅底漆和鋼鐵的噴涂層上有優異的附著力和封閉性能,優異的耐鹽霧性能和耐 鹽水性能, 對工業和化學大氣有較好的耐侯性、良好的耐磨性,與后道漆膜具有良好的 層間附著力,并具有優異的耐久性。 3.水性環氧氧化鐵紅防腐底漆 適用于鋼材的防銹底漆及無鋅涂層底漆。 優良的防銹性能和耐油、耐水、耐鹽水、耐溶劑性能，漆膜堅韌致密與底材有良好 的附著力，施工方便、無環境污染，與環氧、聚氨酯、橡膠、乙烯樹脂等面漆具有良好 的配套性和層間附著力。 4. 水性環氧防腐面漆 適用于鋼結構表面作防腐面漆用，也適用于木材及水泥制品，船舶機床，電器等表 面作防護和裝飾性面漆。 漆膜附著力極好，高強度、高耐磨性、優異的化學性能既有硬度又有韌性，具有極 好的耐化學品性，可抵抗煙霧及中度的酸、堿、鹽及溶劑，對各種惡劣氣候的抵抗力極 佳，如海洋大氣、化工大氣及工業大氣環境，長時間后，不經打磨即可覆涂，不影響層 間附著力，方便施工和維修，是水性涂料，施工方便，無環境污染。 

本技術成果包括： 1.鏈球菌滅活疫苗：通過對鏈球菌不同分離毒株的毒性和免疫原性的一系列篩選和評鑒，確定了原始 種毒菌株為海豚鏈球菌TBY1，研制了1種海豚鏈球菌油佐劑滅活疫苗；建立了疫苗菌株的分離、鑒定、收 集和保藏的系統成套方法和技術，完成了上述疫苗的中試批文申請的完整實驗，進而形成了中試產品的新 藥證書申報的系統文本；確立了海豚鏈球菌對苗種浸泡和育成前期魚種注射的免疫程序。 2.刺激隱核蟲滅活疫苗：首創了水產寄生蟲滅活疫苗；獲得了2株即DYW-1和DB-1刺激隱核蟲蟲株作 為制備刺激隱核蟲幼蟲滅活疫苗的原始種毒蟲株，建立了以SPF卵圓鯧鯵為刺激隱核蟲的繁殖動物模型， 確定了動物模型對刺激隱核蟲的耐受性、最佳感染劑量、批次魚的最佳繁殖代數和仔蟲的最高產量，實現 了刺激隱核蟲在動物模型上的大批量繁殖，建立了模型動物的專門飼養（恒溫、恒流和無特殊病原）的養 殖系統

建立稀散金屬錸功能材料催化氧化烯烴反應體系，實現反應選擇性大于 99% ，產率大于 95% ，控制反應連續或循環可逆，并達到該類催化氧化技術的綠色工藝要求。研發了以錸離子液體既為催化劑又為溶劑的新型均相催化體系。實現了以多種錸離子液體為反應媒介，環辛烯、環己烯等烯烴為底物的高效催化烯烴環氧化工藝。將原催化體系轉化為均相催化體系，降低反應條件至常溫常壓下進行，徹底改變了原體系回收率不高，在循環反應中選擇性、催化活性變低等缺點。控制反應條件在常壓進行，反應溫度為 60 ℃ -80 ℃，實現了反應循環 12 次，催化效果無明顯降低，并實現了選擇性幾乎 100% ，無副產，產率約 98% 。

開發了一種高效的碳氫活化方法用于具有新穎三維結構環肽化合物的合成。研究人員以天然產物骨架為“模板”，采用鈀催化輔助基團導向的策略實現了高難度線性多肽的成環，獲得了一系列“形似”天然產物結構的環肽分子，這為構建環肽分子庫并用于多肽藥物的篩選提供了極為有力開發手段。研究人員發現通過在線性多肽的N-端引入吡啶酰胺（PA）導向基團，在鈀催化下對N-端氨基酸側鏈上γ-位惰性的烷基碳氫進行活化，并和碘代的芳香氨基酸側鏈進行偶聯，構建苯環支撐的環狀骨架，從而得到的各種環狀產物。此策略的的優勢在于，線性多肽可以通過簡單固相合成方式得到，閉環位點可以拓展到多種氨基酸的γ-位甲基或亞甲基上進行，使得關環產物賦有復雜的骨架結構和立體化學性質。一系列具有良好3D形狀的環肽能夠被快速高效獲得，許多環肽產物分子表現出了高度有序的結構性。更值得一提的是，反應可以在水相中進行且得到令人滿意的結果，眾多無保護的極性基團，如氨基，羧基，胍基，羥基等都可以兼容，證明了這一策略具有很好的化學正交性，這為構建環肽分子庫提供了有力的工具。

課題組對新型住宅結構體系-異形柱框架結構進行了系統、深入的研究和工程實踐，主要研究內容和特點如下:/line1、試驗研究充分——完成了異形柱承載力試驗，框架結構低周反復荷載試驗，7、9、12層整體結構模型的模擬地震振動臺試驗。/line2、理論分析完善——提出了異形柱雙向受剪承載力、不等肢異形柱和短肢剪力墻受剪承載力、L、Z等異形柱雙向偏壓承載力計算公式，進行了異形柱空間整體結構彈塑性分析，提出了異形柱框架結構體系的設計方法。/line3、研究成果在重點工程中得到應用——結合江蘇省第一個國家康居示范小區——南京月安花園等工程，完成了多層異形柱框架結構、中高層異形柱框架加短肢剪力墻結構等多項試點工程的設計與施工。/line4、編制標準推廣應用研究成果——編制了江蘇省地方標準《鋼筋混凝土異形柱框架結構技術規程》（DB32/512-2002），對該結構體系的推廣應用、規范和指導設計與施工起到積極的作用，經濟和社會效益巨大。